Question

新冠病毒是RNA病毒，对其进行检测的方法有两种：核酸检测和抗原—抗体杂交检测。下图表示新冠病毒核酸检测的部分流程。

（1）以病毒的RNA为模板通过①______________过程合成cDNA，再对cDNA进行PCR扩增，整个过程为RT-PCR。

（2）进行 RT-PCR需要加入的酶是______________和______________。

（3）一次病毒核酸检测历时需16小时，为了快速检测可采用抗原—抗体杂交，这一技术的关键是要生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。首先向小鼠体内注射___________，从小鼠的___________（器官）中获取已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经过多次____________获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，培养后分离提纯，从而获得大量抗体。该抗体的优点有：___________________________，请举出两例这种抗体在现实中的两大具体应用：______________________________。

Answer

逆转录（反转录） 逆转录酶 Taq酶（热稳定性强的DNA聚合酶） 新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒） 脾脏（免疫器官） 筛选 特异性强、灵敏度高、并可大量制备 作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物

【解析】

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用单克隆抗体技术来制备，单克隆抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生抗体，又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。

（1）以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录或反转录，故题图中以病毒的RNA为模板合成cDNA的过程为①逆转录，再对cDNA进行PCR扩增，这项技术称为RT-PCR。

（2）RT-PCR是扩增DNA的过程，因为加入的模板是RNA，故需要加入的酶是逆转录酶和Taq酶。

（3）若采用抗原—抗体杂交技术进行病毒检测，需要制备能与新冠病毒结合的特异性抗体，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高且能够大量制备的优势，故设计的思路是设法获得能产生该特异性抗体的杂交瘤细胞，步骤如下：①向小鼠体内注射新冠病毒的抗原蛋白（或灭活的新冠病毒），目的是要获得能产生特异性抗体的效应B细胞；②从免疫小鼠的脾脏中提取B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，经多次筛选获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；③将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养、或注射到小鼠腹腔内增殖，从培养液或小鼠腹水中可以提取大量的单克隆抗体。该抗体具有特异性强、灵敏度高、并可大量制备等优点。单克隆抗体可以作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物等实际应用。