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人体移植器官短缺是一个世界性难题。目前科学家正试图利用基因工程方法对哺乳动物器官...

人体移植器官短缺是一个世界性难题。目前科学家正试图利用基因工程方法对哺乳动物器官进行改造,已培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆器官,其操作过程如图:

1)过程一:获取供体组织块并剪碎后,需用_______处理,使组织细胞分散。

2)过程二中需要用Cas9a-Gal抗原基因从供体DNA中敲除,则Cas9_____酶。可将含有a-Gal抗原基因的DNA片段用放射性同位素标记作为探针,使探针与②细胞的DNA杂交,若_______,则表明该基因已成功敲除。

3)过程三:将人类基因导入受体细胞常用_______技术,在工具酶______的作用下将该基因与②细胞的DNA进行定点整合。检测人类基因是否成功表达,可用_______技术。

4)过程五:通常需要将早期胚胎培养至_______阶段才可进行胚胎移植。进行核移植后的重组细胞可以发育成基因修饰克隆供体是因为_______

 

胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 限制性核酸内切(限制) 不能显示出杂交带 显微注射 限制酶和DNA连接酶 抗原抗体杂交 桑椹胚或囊胚 该重组细胞的细胞核遗传物质全部来自于基因修饰的供体,并且该动物细胞核具有全能性 【解析】 基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)将动物组织块剪碎后再用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理一段时间,以使细胞分散开来。 (2)将目的基因敲除需要使用限制性核酸内切酶。含有a-Gal抗原基因的DNA片段用放射性同位素标记作为探针,则该探针会与a-Gal抗原基因互补配对形成杂交带,若不能显示出杂交带,则表明该基因已成功敲除。 (3)将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。将目的基因与细胞DNA进行定点整合需要采用限制酶和DNA连接酶。检测目的基因是否表达,采用抗原抗体杂交技术。 (4)培育转基因动物的最后一步操作是胚胎移植,通常选择发育到桑椹胚或囊胚阶段才可以进行胚胎移植。由于重组细胞的细胞核遗传物质全部来自于基因修饰的供体,并且该动物细胞核具有全能性,因此进行核移植后的重组细胞可以发育成基因修饰克隆供体。
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24-D是一类广泛应用于单子叶作物田间的除草剂,其大量施用导致土壤污染。某研究小组欲从24-D污染土壤样品中筛选24-D降解菌株,采集土样后进行如图操作:

富集培养1组培养液成分:基础无机盐培养液+葡萄糖+24-D

富集培养2组培养液成分:基础无机盐培养液+24-D

基础无机盐培养液成分:MgSO4、(NH42SO4FeS4KH2PO4Na2HPO4

回答下列问题。

1)微生物实验要严格防止杂菌污染,划线纯化时对接种环可采用________灭菌。

2)在特定环境中只让一种来自同一祖先的微生物群体生存的技术叫作纯化。纯化接种的方法有________和平板划线法。纯化培养时,需在基础无机盐培养液中添加以24-D为唯一碳源,还要添加_______

3)富集培养目的是_____,富集培养________(填“1”或“2”)组菌落数多,判断依据是______

4)欲检测所获得的不同菌株对24-D降解能力大小,可将目的菌分别接种在相同浓度的24-D培养液中,培养一段时间后,检测_____,评估其降解能力。

 

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湖泊连通是恢复天然湖泊生态系统结构与功能的重要措施。20177月,梁子湖与牛山湖实施爆破连通。调查研究发现湖泊连通后,湖泊面积及生物多样性显著增加,其中仅鸟类就由57种增加到96种。

1)围湖造田、退耕还湖、连通湖泊等,表明人类活动会改变群落演替的______。在对鸟类丰富度调查时发现其呈现出“水陆过渡带>湖心水域”的分布特点,这表明鸟类的分布主要受到________________的影响。

2)湖泊面积扩大,增强了该生态系统调节气候和蓄洪抗旱的能力,体现了生物多样性的________________价值。结合“合理利用就是最好的保护”,分析下列对渔业资源的保护和利用措施中合理的有____________

①制定休渔制度           ②禁止电鱼炸鱼     ③限定渔网网眼大小       ④限定成鱼捕捞数量

3)恢复生态学主要利用群落演替理论,通过生态系统的自我调节能力,辅以有效的人为手段使其恢复到健康状态。谈谈湖泊连通对湖泊生态系统恢复的积极意义:__________(答出一点即可)。

 

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黑腹果蝇中常见有黑体,小翅,焦刚毛等单突变体。科研小组欲利用野生型及黑体,小翅,焦刚毛等“单突变"纯合品系为材料培育出黑体小翅焦刚毛的“三突变”品系用于科研,科研小组开展的部分杂交实验如表所示。回答下列问题。

组别

确定杂交组合

F1

F2

实验一

黑体长翅(♀)×灰体小翅(♂)

灰体长翅

6灰体长翅(♀):3灰体长翅(♂):3灰体小翅(♂):2黑体长翅(♀):1黑体长翅(♂):1黑体小翅(♂)

实验二

长翅焦刚毛(♀)×小翅直刚毛(♂)

1长翅直刚毛(♀)

1长翅焦刚毛(♂)

 

 

 

1)根据杂交实验一可知,控制小翅的基因位于____________(填“常染色体”或“X染色体”);控制灰体/黑体和长翅/小翅的两对基因遗传_______ (填“遵循”或“不遵循”)自由组合定律。

2)预期杂交实验二的F2_______(填“会”或“不会”)出现9 3 3 1的分离比,原因是______

3)科研小组在杂交实验二F2中筛选到了小翅焦刚毛“双突变”的雄果蝇,利用该品系的雄果蝇可进一步培育出黑体小翅焦刚毛“三突变”品系的果蝇。分析F2中可筛选到部分小翅焦刚毛雄果蝇的原因是__________________________

 

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为了研究影响胰岛素分泌的因素,科学家进行了以下实验。

实验一:受试者持续静脉注射一定浓度葡萄糖,当血糖浓度升高到--定值时停止注射。结果表明,当血糖浓度升高时,胰岛素分泌量增加;停止注射后随血糖下降,胰岛素分泌量也迅速下降;当血糖降至50mg/dl时,无胰岛素分泌。

实验二:受试者口服葡萄糖,在血糖浓度升高到与实验一相同的条件下,发现胰岛素分泌量明显大于实验一,且血浆胰岛素含量升高先于血糖升高。回答下列问题。

1)分析实验一的结果,得出结论是_________________________________

停止注射葡萄糖后血糖持续下降,主要原因是胰岛素促进____________________

2)研究发现,实验二中胰岛素的分泌与肠黏膜分泌的激素抑胃肽有关。口服葡萄糖后,在小肠吸收葡萄糖期间,肠黏膜分泌的抑胃肽,通过________(填“反射弧”或“体液运输”)到达胰岛,与胰岛B细胞上的受体结合,在血糖浓度升高之________(填“前”或“后”)诱导胰岛B细胞分泌大量胰岛素。

3)若持续诱导胰岛素分泌,会导致胰岛B细胞衰竭,进而引起糖尿病。根据以上实验结果,请你给出一项预防糖尿病的合理建议:________________________-

 

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党参的根具有重要的药用价值。合理密植可提高经济效益,生物学“最后产量恒值法则”,即种植密度达到一定值后,单位面积的植株(根、茎、叶等)干物质总量是恒定的。为了探索党参的最佳种植密度,研究者测定了四种种植密度(M1<M2<M3<M4)条件下党参植株叶肉细胞的胞间CO2浓度、净光合速率和单位面积根的千重,结果如表所示。回答下列问题。

密度

胞间CO2浓度(mg•L-1

净光合速率(µmol•m-2•s-1

根的干重(mg/m2

M1

262

1278

21529

M2

273

1058

41064

M3

279

989

54131

M4

296

768

64336

 

1)据表分析,党参高密度种植时影响其光合速率的主要环境因素是____(填“光照强度”或“CO2浓度”)。

2)随着种植密度增加,胞间CO2浓度上升,而净光合速率下降,从光合作用过程分析,原因是_________________________

3)根据最后产量恒值法则并结合党参根的干重数据的变化,推测随着种植密度增加,单位面积根的干重也增加的原因是_____________________

 

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