Question

根据基因工程的有关知识，回答下列问题

（1）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有______________________________等；真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行_______________的。

（2）构建基因文库时，将含有某种生物不同基因的DNA片段，导入_____________中储存。与基因组文库相比，cDNA文库含有的基因数目少，原因是________________________。

（3）体外快速扩增目的基因，常采用_________技术，该技术的原理为___________________。

（4）基因工程中的转化是指_______________________________________________________的过程。检测目的基因是否翻译成蛋白质，是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的__________进行抗原-抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达，形成了相应的蛋白质。

Answer

λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 人工改造 受体菌的群体 cDNA 文库中只含有已表达的基因，而基因组文库中含有生物的全部基因 PCR（多聚酶链式反应） DNA双链复制 目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达 抗体

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。

（2）重组载体导入到受体菌的群体中储存，基因组文库构建完成。cDNA文库只能收集到生物发育到某时期己发生转录的基因，而基因组文库能收集到全部基因，因此与基因组文库相比，cDNA文库的基因数相对要少。

（3）在体外快速大量获得目的基因可以采用PCR技术，该技术的原理是DNA双链复制。

（4）基因工程的转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。检测目的基因是否翻译成蛋白质，是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原-抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达，形成了相应的蛋白质。