Question

物质W是一种含氮有机物，会污染土壤，W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明，某研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌。回答下列问题：

（1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该是_____。

（2）发现培养基上甲、乙两种细菌都能生长并形成菌落（如图所示），如果要得到目标菌，应该选择____菌落进一步纯化，选择的依据是______________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空气中的氮气作为氮源，若要设计实验进一步确定甲、乙菌能否利用氮气作为氮源，请简要写出实验思路__________________________。

（4）该小组将人工合成的一段DNA转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验，请完善相关内容。

①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加酶E的缓冲液，B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_____，三处滴加量相同。

②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，说明_____________；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明________________。

Answer

W 乙 乙菌落周围出现透明圈，说明乙菌能降解W 将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，观察细菌能否正常生长 缓冲液 缓冲液不能降解W 酶E与天然酶降解W的能力相近

【解析】

筛选培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或对某些化学、物理因素的抗性而设计的，能选择性地区分这种微生物的培养基。利用选择培养基，可使混合菌群中的目标菌种变成优势种群，从而提高该种微生物的筛选效率。

（1）该研究小组的目标菌是能够降解物质W的细菌，而物质W是一种含氮有机物，故可作筛选培养基中的氮源。

（2）研究小组的目标菌，是能够降解物质W的细菌，培养基中乙菌落的周围出现透明圈，说明乙菌落能够降解物质W，故乙菌落为该小组的目标细菌。

（3）目标菌能够利用空气中的氮气作为氮源，故选用的筛选培养基不添加氮源，能够在无氮源的培养基上生存的细菌便是目的细菌，故实验操作为：将甲、乙菌分别接种在无氮源培养基上，若细菌能生长，则说明该细菌能利用空气中的氮气作为氮源。

（4）①C处作为空白对照，要排除作为溶剂的缓冲液对实验可能造成的影响，故需要在C处滴加缓冲液，且保持滴加量相同。

②培养基中的透明圈大小表示物质W被降解的情况，若C处不出现透明圈，则说明缓冲液不能降解物质W；若A、B处形成的透明圈直径大小相近，说明物质W被降解的程度相近，即酶E与天然酶降解物质W的能力相近。