Question

生物•选修1:生物技术实践

LB液体培养基和LB固体培养基是微生物实验室中较常用的一种培养基，其配方为10g蛋白胨、10g/L酵母提取物、5g/L氯化钠等，主要用于培养细菌、扩增菌种数量。某研究组开展了氧气对微生物生长、繁殖的影响实验，请回答下列问题：

（1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有________________________________和无机盐等。有些微生物对某些特殊营养物质及____________等条件有特殊要求。

（2）将各类微生物用____________从斜面培养基接种于灭菌过的LB液体培养基中，进行扩大化培养。

（3）将含有LB固体培养基（LB液体培养基中加15g琼脂粉，刚配好，尚未凝固）的锥形瓶放入____________中进行灭菌。灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60℃（不烫手的温度）时，用____________擦拭桌面和双手，在超净工作台中的____________旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管，并做标记。

（4）当试管温度下降到40    ℃（培养基还是液态）时，用灭菌过的移液器吸取0.1mL的各类微生物悬液加入相应试管中并封口，双手快速搓动试管，使菌种均匀分布于培养基内后迅速将封口的试管放置在___条件下使培养基凝固。

（5）将上述试管放置于常温条件下培养48小时后观察实验结果，下图中可表示制作果酒的菌种的分布图的是____________。

Answer

水、碳源、氮源 pH、氧气 接种环 高压蒸汽灭菌锅 酒精 酒精灯火焰 低温 B

【解析】

微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。无菌技术的主要内容：

①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

（1）要配制供微生物生长、繁殖的培养基，其中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等．有些微生物对某些特殊营养物质及pH、氧气等条件有特殊要求。

（2）斜面培养基接种用接种环接种，对微生物进行扩大化培养。

（3）培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌．灭菌完成后将锥形瓶取出，待温度下降到60℃时，用酒精擦拭桌面和双手，在超净工作台中的酒精灯火焰旁将锥形瓶中的LB培养基分装到一系列试管，以防止杂菌污染。

（4）培养基凝固需要放置在低温条件下。

（5）参与果酒制作的菌种是酵母菌，其新陈代谢类型是异养兼性厌氧型，因此图中表示果酒制作菌种的图是B。