Question

酵母菌易于培养且生长迅速，被广泛用于现代生物学研究中。根据所学知识，回答下列问题：

（1）酿制果酒时一般将温度控制在___________，此时在酵母菌细胞的________中进行无氧呼吸，其产物乙醇与_______________溶液反应呈现灰绿色。

（2）某同学采用马铃薯琼脂培养基对酵母菌进行纯化培养，接种酵母菌的方法多种，每种技术操作方法各不相同，但其核心都是___________________________。

（3）该同学用稀释涂布平板法将某稀释度的菌液涂布多个平板，在适宜的条件下分别培养3天后，观察菌落的_________________（答出两点即可）等特征。若平板内菌落特征有明显的差异，可能是培养基灭菌不彻底，可以________________________________进行检测。

（4）现代果酒制造业中，酵母细胞的固定化已经越来越普遍。固定化细胞多采用____________法，该方法对酵母细胞进行固定化过程中，溶化海藻酸钠时采用小火间断加热的方法，目的是______________________________________________________。

Answer

18～25℃ 细胞质基质 酸性重铬酸钾 要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度 形状、大小、隆起程度、颜色 将同批次未接种的培养基置于相同条件下培养 包埋 防止加热太快，海藻酸钠发生焦糊

【解析】

1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；

（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。

2、果酒和果醋制作过程中的相关实验操作：

（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。

（2）灭菌：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。

（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。

（4）发酵：①将葡萄汁装人发酵瓶，要留大约1/3的空间，并封闭充气口。②制葡萄酒的过程中，将温度严格控制在18℃~25℃，时间控制在10~12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行，及时的监测。③制葡萄醋的过程中，将温度严格控制在30℃~35℃，时间控制在前7~8d左右，并注意适时通过充气口充气。

（1）20℃左右最适合酵母菌繁殖，因此酒精发酵时一般将温度控制在18~25℃，此时在酵母菌细胞的细胞质基质中进行无氧呼吸，其产物乙醇与酸性重铬酸钾溶液反应呈现灰绿色。

（2）接种酵母菌的方法多种，但都要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。

（3）该同学用稀释涂布平板法将某稀释度的菌液涂布多个平板，在适宜的条件下分别培养3天后，观察菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等特征。若平板内菌落特征有明显的差异，可能是培养基灭菌不彻底，可以将同批次未接种的培养基置于相同条件下培养进行检测。

（4）与酶相比，酵母菌细胞体积较大，多采用包埋法进行固定，该方法对酵母细胞进行固定化过程中，为防止加热太快，海藻酸钠发生焦糊，溶化海藻酸钠时采用小火间断加热。