Question

皮肤作为人体最大的器官拥有达 1.8 m² 的表面积，其主要功能是作为物理屏障，保护机体免受外来生物或有毒物质的侵害。同时，皮肤也是人体与外界环境接触的部位，因此常驻有各类微生物，包括细菌、真菌等，可通过微生物培养技术了解我们的皮肤表面的微生物分布情况。回答下列问题：

（1）微生物培养利用的培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、无机盐、碳源、___________ 。 由 于 不 同 种 类 的 微 生 物 的 菌 落 特 征 表 现 不 同 ， 因 此 可 以 利用____________________培养基来培养、观察菌落特征，对微生物进行初步的鉴定和分类。

（2）有同学通过制备牛肉膏蛋白胨培养基来培养附着在皮肤表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。倒平板时需要在酒精灯火焰旁操作，待平板冷却凝固后，还需要将平板_________。为了确定培养基灭菌效果是否达到要求，可随机取若干_______________，在适宜条件下培养一段时间，观察该培养基是否出现了菌落，若没有出现，则证明培养基的灭菌效果达到了要求。

（3）采集并制备样液，并将样液接种到培养基的平板上培养。采用的接种方法有_________和______________，若采用前者，则操作中接种环在使用前要在酒精灯火焰上先灼烧，其目的是_________________，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是______________。

Answer

氮源 固体 倒置 灭菌后的空白培养基 平板划线法 稀释涂布平板法 杀灭接种环上的微生物 使微生物数目能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果

【解析】

1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求．对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。

2、微生物常见的接种的方法

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）培养基中一般都含有水、无机盐、碳源、氮源。根据题中信息，观察的是菌落特征，由此确定所利用的培养基为固体培养基。

（2）为了防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染，应将平板倒置。随机取若干灭菌后的空白培养基进行培养，若一段时间后出现了菌落，则培养基灭菌不合格。

（3）样液接种时通常有平板划线法和稀释涂布平板法，在平板划线法的操作中，接种环在使用前要先灼烧，其目的是杀灭接种环上的微生物，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是使微生物量能够随着划线次数的增加而逐步减少，以达到分离的效果。