Question

（一种广泛使用的除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可用一定方法选育能降解该除草剂的细菌（己知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）。

（1）现有一升土壤浸出液，为了对土壤中的细菌进行计数，各取0．1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养。接种需选择上图工具中的__________进行实验操作。计数结束记录上述三个培养皿中的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液中菌体数为__________。

（2）在培养基上形成的菌落中，有透明圈菌落利用的氮源主要是__________，据此可筛选出目的菌。实验结果如右上图显示的A～E五种菌株中，__________是最理想菌株，判断依据是__________。

（3）在无菌操作下，将最理想的单菌落用接种环取出，再用________法接种在斜面上，37℃培养24h后，置于________（填具体的温度）冰箱中保存。

Answer

B 5.6×108 该除草剂 E 降解圈直径与菌落直径比值最大 划线 4℃

【解析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
对于频繁使用的菌种，常用临时保藏法；对于需要长期保存的菌种，常用甘油管藏法。

（1）常用稀释涂布平板法对土壤中细菌进行计数，涂布平板法要用B涂布器进行操作。每升土壤浸出液中菌体数为（55+56+57）÷3×103×104=5.6×108个。
（2）要筛选抗除草剂的菌体，培养基中应该以该除草剂作为唯一氮源。图中E菌株降解圈直径与菌落直径比值最大，故是最理想的菌株。
（3）菌种保藏时，可将单菌落取出用划线法接种在斜面上，适宜的温度下培养后，再放入4℃的冰箱中保存。