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乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类革兰氏阳性细菌的总称,经革兰氏染色后呈紫色。...

乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类革兰氏阳性细菌的总称,经革兰氏染色后呈紫色。分离乳酸菌常用MRS固体培养基:蛋白胨5 g、牛肉膏5 g、酵母提取物2.5 g、柠檬酸二铵1 g、水500 mL、乙酸钠2.5 gK2HPO41 gMnSO4·4H2O0.125 g、琼脂12.5 gMgSO4·H2O0.29 gCaCO35 g、葡萄糖10 g。请回答:

1)从MRS固体培养基成分可以看出乳酸菌喜________(填“荤”或“素”)。MRS培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌,灭菌时设置的压力和时间分别为________g/cm2__________min

2)若用革兰氏染色法对大肠杆菌进行染色,结果____(填“是”或“否”)呈紫色。

3)不仅可以制备固定化酶,还可以制备固定化细胞。用乳酸菌制作酸乳时,可对乳酸菌进行固定化处理,方法为:称取适量海藻酸钠配成水溶液,加入乳酸菌并搅拌均匀,以一定速度滴入CaCl2溶液中形成凝胶,使其凝固成珠状。上述采用的固定方法是__________

4)乳酸菌可用于泡菜制作。在对泡菜作亚硝酸盐定量检测时,若样液测定时的比色杯光程小于制作标准曲线时的比色杯光程,则测得的样液中亚硝酸盐含量__________(填“偏大”“偏小”或“不影响”);若泡菜样液测得的OD值过大,超出标准曲线,则最适宜的做法是__________

 

荤 500 30 否 包埋法 偏小 对样品溶液进行适当稀释 【解析】 固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术,包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。细胞个体大,难以被吸附或结合,多采用包埋法固定化。 测定亚硝酸盐含量时的标准曲线制作方法:①取0、0.5、3.0和5.0 mL亚硝酸钠标准溶液,分别放在25 mL容量瓶中,各加入4.5mL氯化铵缓冲液、2.5 mL60%乙酸溶液和5mL显色剂,加水定容,混合均匀,暗处理25min;②用光程1 cm的比色杯在550 nm处分别测定光密度值(OD值);③以亚硝酸钠质量为横坐标,以光密度为纵坐标,绘制标准曲线。 (1)由MSR培养基成分中含有牛肉膏、蛋白胨等可知,乳酸菌喜荤。利用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌时,设置的压力和时间分别为500 g/cm2、30 min。 (2)大肠杆菌是革兰氏阴性细菌,用革兰氏染色法对大肠杆菌进行染色,结果不会呈现紫色。 (3)分析题文描述可知,对乳酸菌这类细胞进行固定化处理,采用的是包埋法。 (4)在对泡菜制作过程中的亚硝酸盐定量检测时,若样液测定时的比色杯光程小于制作标准曲线时的比色杯光程,则测得的样液中亚硝酸盐含量偏小。若泡菜样液测得的OD值过大,超出标准曲线,则最适宜的做法是对样品溶液进行适当稀释后再次测定。
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考点分析:
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(一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可用一定方法选育能降解该除草剂的细菌(己知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。

1)现有一升土壤浸出液,为了对土壤中的细菌进行计数,各取01mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养。接种需选择上图工具中的__________进行实验操作。计数结束记录上述三个培养皿中的菌落数分别为555657,则每升原土壤浸出液中菌体数为__________

2)在培养基上形成的菌落中,有透明圈菌落利用的氮源主要是__________,据此可筛选出目的菌。实验结果如右上图显示的AE五种菌株中,__________是最理想菌株,判断依据是__________

3)在无菌操作下,将最理想的单菌落用接种环取出,再用________法接种在斜面上,37℃培养24h后,置于________(填具体的温度)冰箱中保存。

 

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回答微生物及应用有关的问题:

1)幽门螺杆菌(Hp)是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。若要从含有幽门螺杆菌的胃中样液里分离出幽门螺杆菌,用来筛选幽门螺杆菌的培养基常含有KH2PO4Na2HPO4,其作用有______(答出一点)。若要测定活菌数量,可采用________法。

2)三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素,但该菌株的高产性状容易退化,需要定期筛选出高产菌株,研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的TTC(氯化三苯基四氮唑)还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。工业生产上提取天然胡萝卜素的方法除从植物或岩藻中获取外,还可利用三孢布拉霉菌发酵来生产。将菌液涂布到含TTC的培养基上,目的是筛选出__________,对照组需涂布等量的无菌水以判断培养基是否被污染。

 

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某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材消毒愈伤组织培养出芽生根移栽”。下列有关叙述错误的是(   

A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害

B.用赤霉素处理愈伤组织细胞,可获得染色体加倍的细胞

C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控

D.生根时,培养基通常应含α-萘乙酸等生长素类调节剂

 

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为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是

A.过程①获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中

B.过程②需提高生长素的比例以促进芽的分化

C.过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生

D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性

 

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下列关于泡菜制作过程中亚硝酸盐测定的说法正确的是

A.泡菜腌制过程中,亚硝酸盐含量先升高后降低

B.泡菜中乳酸菌的繁殖,使得亚硝酸盐含量骤增

C.泡菜腌制过程中的食盐用量应尽量少,以减少产亚硝酸盐菌的繁殖

D.比色法测定泡菜亚硝酸盐含量时,亚硝酸盐含量与OD值负相关

 

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