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回答下列关于植物组织培养的问题。 (1)植物组织培养和微生物培养都会用到超净台,...

回答下列关于植物组织培养的问题。

1)植物组织培养和微生物培养都会用到超净台,实验前必须打开超净台的____________________,前者可以排出工作室原来的空气,将尘埃粒和生物颗粒带走。

2)利用MS培养基配置发芽培养基时,除了加相应量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外,还需要加入一定量的__________,以配置成固体培养基。培养基配置后需经高压蒸汽灭菌后备用,影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、__________等因素。

3)若使用自然生长的菊花茎段,进行菊花的组织培养,则可用__________和次氯酸钠对茎段进行消毒;若茎段取自经__________培养的菊花幼苗,则不需要进行消毒,可直接插入生芽培养基进行培养。发芽培养时__________(需要/不需要)光照条件。

 

过滤风 紫外灯 琼脂 时间 70%乙醇 无菌 需要 【解析】 植物组织培养的注意事项:(1)接种时应注意的事项:接种室要消毒;无菌操作;接种时要防止交叉污染;接种完立刻盖好瓶口。(2)外植体接种前,需要将接种室、接种箱灭菌和对外植体消毒的操作:接种前一天,将接种室的四个角落用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸;接种前1小时,在接种室内用喷雾器喷洒来苏水;桌椅也用来苏水擦拭;接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。接种前,操作者用肥皂清洗双手,擦干,再用酒精棉球擦拭双手。用次氯酸钠溶液将外植体消毒。 实验室常用的消毒方法:煮沸消毒、化学药物消毒、紫外线消毒。实验室常用的灭菌方法:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。 (1)超净台的工作原理是:在特定的空间内,室内空气通过特殊装置过滤吹出的洁净过滤风可以排出工作室原来的空气,将尘埃颗粒和生物颗粒带走,形成无菌的工作环境。在此操作过程中,同时需打开紫外灯,持续30分钟以上。 (2)利用MS培养基配置成的发芽培养基应为固体培养基,因此除了加相应量的BA溶液、NAA溶液、蔗糖外,还需要加一定量的凝固剂琼脂,经高压蒸汽灭菌后备用。高压蒸汽灭菌一般在压力为100kPa,温度为121℃的条件下,维持15~30min。因此影响高压蒸汽灭菌效果的因素有温度、压力、时间等因素。 (3)进行菊花的组织培养,需要对外植体进行消毒处理,用70%乙醇和5%次氯酸钠对茎段进行消毒;若茎段取自经无菌培养的菊花幼苗,则不需进行消毒,可直接在无菌条件下插入生芽培养基进行培养。发芽培养时需要在光照条件下培养,以利于叶绿素的合成。
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回答与酿酒和制醋有关的问题:

1)为了获得优良的酿酒红曲霉菌株,将原菌株的孢子诱变处理后制成较稀浓度的单孢子悬液,这样做的目的是在培养时有利于获得__________

2)大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后,用某酿酒酵母进行酒精发酵,发酵完毕后得到新鲜红曲酒,酒中乙醇浓度不超过15%。其主要原因是当发酵液中的乙醇浓度接近15%时,_________A.乙醇氧化逐渐增强直至平衡     B.葡萄糖分解逐渐增强直至平衡  C.乙醇氧化逐渐减弱直至停止       D.葡萄糖分解逐渐减弱直至停止 )。

3)已知葡萄糖与蒽酮试剂反应能产生颜色,采用光电比色法测定红曲酒中的葡萄糖含量的步骤如下:第一步,标准曲线的制作。用蒸馏水配制一系列浓度的__________,与蒽酮试剂反应后,用比色计测定,并制作以__________为横坐标的标准曲线。第二步,样品处理。将待测酒样品通过活性炭脱色,除去酒原有的颜色。第三步,样品测定与计算。

4)在红曲醋生产工艺中,将适量的红曲酒、水、醋化醋杆菌等混合,再添加一定量谷壳糠等制成松散的发酵料,发酵料松散的意义是增加__________,以利于醋酸发酵。发酵过程中________(“要”或“不要”)通入空气。

 

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乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类革兰氏阳性细菌的总称,经革兰氏染色后呈紫色。分离乳酸菌常用MRS固体培养基:蛋白胨5 g、牛肉膏5 g、酵母提取物2.5 g、柠檬酸二铵1 g、水500 mL、乙酸钠2.5 gK2HPO41 gMnSO4·4H2O0.125 g、琼脂12.5 gMgSO4·H2O0.29 gCaCO35 g、葡萄糖10 g。请回答:

1)从MRS固体培养基成分可以看出乳酸菌喜________(填“荤”或“素”)。MRS培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌,灭菌时设置的压力和时间分别为________g/cm2__________min

2)若用革兰氏染色法对大肠杆菌进行染色,结果____(填“是”或“否”)呈紫色。

3)不仅可以制备固定化酶,还可以制备固定化细胞。用乳酸菌制作酸乳时,可对乳酸菌进行固定化处理,方法为:称取适量海藻酸钠配成水溶液,加入乳酸菌并搅拌均匀,以一定速度滴入CaCl2溶液中形成凝胶,使其凝固成珠状。上述采用的固定方法是__________

4)乳酸菌可用于泡菜制作。在对泡菜作亚硝酸盐定量检测时,若样液测定时的比色杯光程小于制作标准曲线时的比色杯光程,则测得的样液中亚硝酸盐含量__________(填“偏大”“偏小”或“不影响”);若泡菜样液测得的OD值过大,超出标准曲线,则最适宜的做法是__________

 

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(一种广泛使用的除草剂(含氮有机物)在土壤中不易被降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可用一定方法选育能降解该除草剂的细菌(己知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。

1)现有一升土壤浸出液,为了对土壤中的细菌进行计数,各取01mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养。接种需选择上图工具中的__________进行实验操作。计数结束记录上述三个培养皿中的菌落数分别为555657,则每升原土壤浸出液中菌体数为__________

2)在培养基上形成的菌落中,有透明圈菌落利用的氮源主要是__________,据此可筛选出目的菌。实验结果如右上图显示的AE五种菌株中,__________是最理想菌株,判断依据是__________

3)在无菌操作下,将最理想的单菌落用接种环取出,再用________法接种在斜面上,37℃培养24h后,置于________(填具体的温度)冰箱中保存。

 

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回答微生物及应用有关的问题:

1)幽门螺杆菌(Hp)是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。若要从含有幽门螺杆菌的胃中样液里分离出幽门螺杆菌,用来筛选幽门螺杆菌的培养基常含有KH2PO4Na2HPO4,其作用有______(答出一点)。若要测定活菌数量,可采用________法。

2)三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素,但该菌株的高产性状容易退化,需要定期筛选出高产菌株,研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的TTC(氯化三苯基四氮唑)还原为红色复合物,且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。工业生产上提取天然胡萝卜素的方法除从植物或岩藻中获取外,还可利用三孢布拉霉菌发酵来生产。将菌液涂布到含TTC的培养基上,目的是筛选出__________,对照组需涂布等量的无菌水以判断培养基是否被污染。

 

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某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材消毒愈伤组织培养出芽生根移栽”。下列有关叙述错误的是(   

A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害

B.用赤霉素处理愈伤组织细胞,可获得染色体加倍的细胞

C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控

D.生根时,培养基通常应含α-萘乙酸等生长素类调节剂

 

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