科学家植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“...

科学家植物细胞杂交方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株如图，其中①～⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：

（1）实现过程②的技术是______________，在此之前使用__________________酶处理细胞以除去细胞壁。此操作应在_________（等渗/低渗/高渗）溶液中进行，过程②如放在神舟六号飞船上则更易进行，这是因为________________________________________。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为________________。

（2）在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是______________，其中过程④相当于__________过程，⑤涉及的分裂方式为__________________。

（3）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含__________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于________倍体植株。

原生质体融合纤维素酶和果胶酶等渗飞船上无重力干扰更易进行细胞的融合高尔基体细胞的全能性脱分化有丝分裂 m＋n 单【解析】分析题图：图示为植物体细胞杂交过程示意图，其中①表示去壁获取原生质体的过程；②表示人工诱导原生质体融合；③表示再生出新细胞壁的过程；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程。（1）过程②是利用物理或化学方法（如聚乙二醇试剂）诱导原生质体融合，在此之前使需用纤维素酶和果胶酶处理细胞以除去细胞壁。已除去细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中，细胞呈圆球状，飞船上无重力的干扰，更易进行细胞的融合，在植物细胞中，高尔基体与细胞壁的形成有关。（2）将离体的杂种细胞培育成杂种植株需要采用植物组织培养技术，该技术的原理是植物细胞具有全能性；图中④是脱分化过程，⑤是再分化过程，该过程中细胞通过有丝分裂方式增殖。（3）“番茄﹣﹣马铃薯”细胞是由番茄体细胞和马铃薯体细胞经过融合而成的，因此具有番茄和马铃薯的全部遗传物质。若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞含n条染色体，则“番茄﹣马铃薯”细胞内含m+n条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄﹣马铃薯”植株为四倍体，此杂种植株的花粉是生殖细胞，由生殖细胞直接发育而来的生物体，不管含有多少染色体组，都是单倍体。

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考点分析：

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本题包含Ⅰ和Ⅱ两部分

Ⅰ．用生物技术获得生物新品种的过程，据图回答：

（1）上图中采用的目的基因获取方法是__________技术。

（2）在培养转基因绵羊的过程中常用的受体细胞是_________，目的基因导入的方法是_________________。其中在动物细胞培养过程中，需让培养液中含有一定量的CO2，其主要作用是_______________________。

（3）在抗虫棉的培育过程，其中④过程常用的方法是___________________，要确定目的基因（抗虫基因）导入受体细胞后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和鉴定工作，请写出在个体生物学水平上的鉴定具体方法是：________________________________________________。

Ⅱ．鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图(ampR为抗氨苄青霉素基因)，其中①～④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：