Question

转基因抗病香蕉的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：

（1）图中限制酶切割DNA时破坏的是两个_____________之间的化学键。

（2）在构建图1中的重组质粒时要保证目的基因被连接在质粒上特定的_____________和终止子之间才能保证目的基因在受体细胞中被成功________。

（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是______________，同时也应该用相同的酶对质粒进行切割，这样处理的原因是________________________________。请写出单独用PstⅠ切割质粒后的片段：______________________________________。

（4）转基因抗病香蕉的培育是否发生了可遗传变异？______________。

Answer

脱氧(核糖)核苷酸 启动子 转录（或者填表达） PstⅠ和EcoRⅠ 用相同的酶切割质粒才能产生与目的基因相同的末端，便于二者进行拼接 和 是

【解析】

分析题图：图示为转基因抗病香蕉的培育流程图，首先采用基因工程技术得到含有目的基因的受体细胞（获取目的基因、构建基因表达载体、采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达）；其次采用植物组织培养技术将受体细胞培育成转基因植株。

（1）限制酶特异性识别DNA中特定的核苷酸序列，切断两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。

（2）在构建图1中的重组质粒时要保证目的基因被连接在质粒上特定的启动子和终止子之间才能保证目的基因在受体细胞中被成功转录。

（3）含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，但限制酶Sma I的切割位点位于目的基因上，用该酶切割含有目的基因的外源DNA分子时会破坏目的基因，所以选限制酶Pst I和EcoRI对目的基因进行切割，这样不会对目的基因造成破坏。故使用这两种限制酶切割目的基因和质粒。用相同的酶切割质粒才能产生与目的基因相同的末端，产生相同的黏性末端，便于二者进行拼接。质粒会被限制酶Pst l、Sma I、EcoR I同时切割成三段，EcoR I、Pst l切割质粒形成的是黏性末端，且每种酶切割质粒后会形成两个黏性末端，Sma I切割形成的是平末端，所以三种限制酶切割质粒会形成四个黏性末端。根据图2显示，可以推出单独用PstⅠ切割质粒后的片段：和。

（4）转基因抗病香蕉的培育原理是基因重组，发生了可遗传变异。