Question

细胞融合又称体细胞杂交，是指两个或更多个相同或不同细胞融合形成单个细胞的过程。下图为细胞融合的一般过程，请据图回答：

(1)若A、B为植物细胞，在细胞融合之前已用__________处理，除去了细胞壁；A、B到C的过程中，常用的物理方法是_____________(至少写两个)。形成的D细胞还要应用植物组织培养技术把D培养成植株。

(2) 若A、B是动物细胞，一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，原因是_________，然后用胰蛋白酶处理使其分散开来；从A、B到C的过程中，常用的诱导剂是____。

(3)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了________；图中B为_____________________。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为克隆，这种细胞的特点是_________________________________________。

(4)若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有_____种(只考虑两个细胞的相互融合)；用来培养的D细胞应该是_________，从中选择出它的方法是用_______________________培养。获得D后，常用的培养方法在体外条件下做大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

Answer

纤维素酶和果胶酶 电激、振动、离心 动物胚胎或幼龄动物的器官或组织细胞的分化程度低，细胞增殖能力强，容易培养 聚乙二醇（PEG）或灭活的病毒 特异性抗原 骨髓瘤细胞（或肿瘤细胞） 既能无限增殖又能产生特异性抗体 3 杂交瘤细胞 特定的选择性培养基

【解析】

植物体细胞杂交需利用酶解法去除细胞壁，植物细胞融合的方法有物理方法、化学方法；动物细胞培养需用胰蛋白酶将动物组织分散形成单个动物细胞，制成细胞悬浮液，动物细胞融合的方法有物理方法、化学方法、生物方法，动物细胞工程可用于制备单克隆抗体。诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导方法有聚乙二醇、电激等。

(1)植物细胞融合前需用酶处理除去细胞壁，如纤维素酶和果胶酶；诱导原生质体融合的物理方法有离心、振动、电激等。

(2) 由于动物胚胎或幼龄动物的器官或组织细胞的分化程度低，细胞增殖能力强，容易培养，所以一般选择动物胚胎或幼龄动物的器官和组织。诱导动物细胞融合的方法常用聚乙二醇或灭活的仙台病毒。

(3)制备单克隆抗体前需向小鼠注射特异性抗原，图中B是骨髓瘤细胞，将杂交瘤细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为克隆，这种细胞既能无限增殖又能产生专一的抗体。

(4)考虑两个细胞的相互融合，形成的C有三种：AA、BB、AB，用来培养的D细胞应是杂交瘤细胞（AB），获得杂交瘤细胞需用特定的选择性培养基筛选。