Question

下列有关微生物培养和保藏的叙述，正确的是（    ）

A.配制微生物培养基时，一定要加入琼脂

B.将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，可长期保藏

C.分离计数时，可用平板划线法对需计数的微生物进行分离

D.划线操作时，不能将最后一区的划线与第一区的划线相连

Answer

D

【解析】

1.微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落，该方法不仅可以分离，而且可以计数。

2.菌种保藏：临时保藏的方法。首先，将菌种接种到试管的固体斜面培养基上,在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3~ 6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。但是，这种方法保存的时间不长，菌种容易被污染或产生变异。对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油管藏的方法。在3 mL的甘油瓶中，装入1 mL甘油后灭菌。将1mL培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分混匀后，放在20℃的冷冻箱中保存。

A、配制微生物液体培养基时不需要加入琼脂，A错误；

B、由分析可知，将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，可临时保藏，B错误；

C、分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离，平板划线法不能计数，C错误；

D、划线操作时，注意不能将最后一区的划线与第一区的划线相连，否则达不到逐步分离的目的，无法得到单菌落，D正确。

故选D。