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某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,...

某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中,准备从猪的血液中初步提取血红蛋白,设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下:

请回答下列有关问题:

1)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH70的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,破碎细胞的原理是________

2)血红蛋白粗分离阶段,透析的目的是____________,若要尽快达到理想的透析效果,可以________________________(写出一种方法)。

3)电泳利用了待分离样品中各种分子的______________________________等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。

4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳,观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有_____种血红蛋白,从分子遗传学的角度作出的解释是__________________________

 

生理盐水 渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破) 除去小分子杂质 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液 带电性质以及分子大小、形状 2 携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质 【解析】 1、血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有:(1)样品处理:①红细胞的洗涤,②血红蛋白的释放,③分离血红蛋白溶液。(2)粗分离:①分离血红蛋白溶液,②透析。(3)纯化:调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。(4)纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。 2、电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离或鉴定。 (1)样洗涤红细胞可以用生理盐水。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎红细胞,其原理是渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时,细胞吸水涨破)。 (2)透析的目的是除去小分子杂质;若要尽快达到理想的透析效果,可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液。 (3)电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。 (4)由图可知携带者有2种血红蛋白,原因是携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因,可以控制合成两种不同的蛋白质。
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在研究不同pH对酶活性的影响的实验中,准备5支含有等量蛋白酶溶液但pH不同的试管,每支试管中加一块1 cm3正方体凝固蛋白块,试管均置于25 ℃室温条件下。各试管蛋白块消失的时间记录如下表,请据下表回答:

试管编号

酶溶液的pH

蛋白块消失的时间/min

1

1

13

2

2

9

3

3

11

4

4

45

5

5

>60

 

 

1)请用曲线定性表示pH与酶活性及蛋白块消失时间之间的关系__________

2)如图中的曲线表示不同pH对酶催化作用的影响。其中纵坐标(V)表示蛋白块体积(cm3),横坐标(t)表示蛋白块消失所需的时间(min),则能表示2号试管实验情况的曲线是__________

3)若5号试管的实验情况为曲线,你如何解释?______________________________

4)请提供两种改进实验的方法,使实验能在更短时间内完成,并解释每种方法为什么能缩短实验时间。

方法一:___________________________

解释:_____________________________

方法二:________________________

解释:___________________

5)为了确定蛋白块的消失是由于酶的作用,则还应对实验进行什么设计?请说明控制的变量。___________________________

 

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下图简单表示葡萄酒的酿制过程,请据图

1)葡萄酒的酿制原理是:先通气使酵母菌进行________(呼吸方式),以增加酵母菌的数量,然后使酵母菌发酵获得葡萄酒,可采用______________鉴定酒精。

2)在甲中进行搅拌的目的是___________,乙中排出的气体是发酵过程产生的______;写出甲、乙中有关的化学反应式:甲___________________,乙_______________________

3 如果丙忘记盖上盖子,一段时间后会变酸,这是由于酒精在________(微生物)的作用下生成了________,写出此时发生的化学反应式:________________________________

 

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关于提取β-胡萝卜素的实验流程,叙述不正确的是(   )

A.萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水混溶

B.为了提高萃取的效率,可以适当提高温度,可采用酒精灯直接加热的方法

C.萃取过程中在瓶口安装冷凝回流装置,是为了防止加热时有机溶剂的挥发

D.浓缩的过程是为了把萃取剂与胡萝卜素分开

 

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橘皮精油的粗提取实验中,为提高出油率,需要将橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡,其目的是(   

①能破坏细胞结构,分解果胶       ②中和细胞中的酸性物质,破坏细胞的薄壁组织 ③防止橘皮在压榨过程中滑脱,提高出油率       ④便于橘皮油与杂质分离

A.①②③④ B.①②④ C.①③ D.②④

 

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凝胶色谱法分离蛋白质时,凝胶的种类较多,但其作用的共同点是(   

A.改变蛋白质分子通过凝胶时的路径

B.吸附一部分蛋白质,从而影响蛋白质分子的移动速度

C.将酶或细胞固定在凝胶中

D.与蛋白质分子进行化学反应,从而影响其移动速度

 

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