Question

佩戴口罩是预防病原体感染的有效措施。某研究小组对非灭菌的一次性口罩中的微生物进行检测，通过分析微生物的种类和数量来确定口罩的合格性。回答下列问题。

（1）从包装中取样，准确称取10 g（近似10 mL）样品。剪碎后加入到90 mL灭菌生理盐水中，充分混匀，得到一个生理盐水样液。待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作菌落计数。取4个培养基，进行___________灭菌处理，待冷却后采用___________法分别接种0．1 mL样液，放入恒温培养箱中培养一段时间后，平板上长出的菌落数分别为31、42、36和35，那么1 g口罩样品中细菌数量为___________。根据《中华人民共和国医药行业标准》对非灭菌一次性口罩的微生物指标要求（如表），该研究小组检测的口罩___________（填“是”或“否”）合格。

口罩微生物指标

细菌菌落数 CFU/g	大肠杆菌	绿脓杆菌	金黄色葡萄球菌	脓血性链球菌	真菌
≤100	不得检出	不得检出	不得检出	不得检出	不得检出

（2）为确定检测样液中大肠杆菌数目，需在培养基中加入___________用于鉴别，统计培养基上___________（颜色）菌落的数目。

（3）若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行检测，将样液接种到甘露醇高盐琼脂培养基上培养，此培养基属于___________培养基。培养一段时间后，该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静止培养的细菌生长速度快。分析其原因是________________________________________。

Answer

高压蒸汽 稀释涂布平板 3600 否 伊红美蓝 黑色 选择 振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率

【解析】

1、消毒和灭菌：

消毒

灭菌

概念

使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）

使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）

常用方法

煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法

灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌

适用对象

操作空间、某些液体、双手等

接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

2、微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）对培养基进行灭菌应该采用高压蒸汽灭菌法；计数活菌数目时，采用的接种方法是稀释涂布平板法；为了结果准确，计数时应选取菌落数在30～300内的平板，那么1g口罩样品中细菌数量为（31+42+36+35）÷4÷0.1×10=3600。根据表格中信息：合格口罩不得检测出细菌和真菌，可知该研究小组检测的口罩不合格。

（2）为确定检测样液中大肠杆菌数目，需在培养基中加入伊红-美蓝用于鉴别，统计培养基上（紫）黑色菌落的数目。

（3）若要对口罩中的金黄色葡萄球菌进行检测，将样液接种到甘露醇高盐琼脂培养基上培养，在该培养基上只有金黄色葡萄球菌可以生存，因此该培养基属于选择培养基。培养一段时间后，该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静止培养的细菌生长速度快，原因是振荡培养能提高培养液中溶解氧的含量，同时可以使菌体与培养液充分接触，提高营养物质的利用率。