Question

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。请回答下列问题。

（1）微生物A产生的油脂不易挥发，可选用____________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以______________为碳源的固体培养基进行培养，从功能上划分该培养基属于________培养基。

（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数，一般选用___________法进行计数。

（4）为了实现酶的回收利用，常采用固定化酶的技术。固定化酶一般不采用_________方法，原因是_______________________________。

（5）生物体内绝大多数酶的化学本质是蛋白质，在用凝胶色谱柱分离蛋白质时，先洗脱出来的是相对分子质量大的蛋白质，原因是_____________________________。

Answer

萃取法 脂肪 选择 稀释涂布平板法 物理吸附法或化学结合 酶分子太小，容易从包埋材料中漏出 相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快

【解析】

1、植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为油脂不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。

2、凝胶色谱法的原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法，相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

（1）因为油脂不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，可选用压榨法或萃取法提取。

（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，故培养基中应该添加脂肪作为唯一碳源以抑制不能以脂肪做碳源的微生物的生长。

（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，常用稀释涂布平板法进行计数。

（4）由于酶分子太小，容易从包埋材料中漏出，所以固定化酶常用物理吸附法或化学结合法，而不用包埋法。

（5）根据上述分析可知，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，所以最先洗脱出来的是相对分子质量大的蛋白质。