Question

图1表示抗体的基本结构，V_L是轻链可变区，V_H是重链可变区。不同抗体可变区不同。杂交瘤技术的出现使抗体的制备进入了单克隆时代，而20世纪90年代发明的噬菌体抗体库技术为单抗的制备开辟了全新领域。图2表示人源性噬菌体抗体生产过程流程图。

请回答下列问题：

（1）运用杂交瘤技术制备单克隆抗体，用特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞后，再经过_________和__________，目的是筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。与常规的血清抗体相比，单克隆抗体最大的优越性是___________________。

（2）在免疫过程中，需要向健康人体注射特定抗原（如乙肝疫苗），并且每隔一周重复注射一次，重复注射的目的是______________________________________。

（3）过程①使用了RT-PCR技术，与常规PCR技术相比较，RT一PCR增加了_____过程。

（4）从人源性噬菌体抗体生产过程分析，含抗体基因片段最终需要整合到_________中。

Answer

克隆化培养 抗体检测 特异性强、灵敏度高，可大量制备 加强免疫，增加体内特定浆细胞的数量 逆转录 噬菌体DNA

【解析】

1、杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一抗体；人工免疫时需要定期注射抗原，其目的是加强免疫，使机体产生更多的浆细胞。

2、图2过程①先是以mRNA为模板合成DNA，然后再利用PCR使其扩增；在PCR中需要加入特定的引物；将目的基因导入大肠杆菌时，需要先用钙离子处理大肠杆菌使其成为感受态细胞。噬菌体在侵染细菌时，是其遗传物质DNA进入大肠杆菌体内，因此需要将含抗体基因片段整合到噬菌体DNA中。

（1）用特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞后，需要再经过克隆化培养和专一抗体检测，目的是筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。与常规的血清抗体相比，单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高，可大量制备的优点。

（2）人工免疫时需要多次注射疫苗，增加抗原数量，其目的是加强机体免疫能力，增加体内特定浆细胞的数量。

（3）RT-PCR技术是mRNA逆转录为cDNA再进行PCR扩增的过程。过程①使用了RT-PCR技术，与常规PCR技术相比较，RT-PCR增加了逆转录过程，需要逆转录酶。

（4）噬菌体在侵染大肠杆菌时，其遗传物质DNA进入大肠杆菌体内，并在大肠杆菌内完成复制，因此含抗体基因片段最终需要整合到噬菌体DNA中。