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器官移植中供体器官的严重缺乏一直是困扰需要器官移植患者的问题。中山大学眼科中心主...

器官移植中供体器官的严重缺乏一直是困扰需要器官移植患者的问题。中山大学眼科中心主任葛坚领导的研究小组培育出了猴鼠嵌合体——“猴鼠”,期待成果可用于人体角膜等器官的移植。根据科研过程示意图回答有关问题:

1)图中①体外培养时,应将培养皿或松盖培养瓶置于含______________的混合气体的培养箱中进行培养。为了防止杂菌污染要在培养基中加入一定量的___________;而由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全弄清楚,所以还要加入_________________

2)应将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠囊胚的_______________部位,才能伴随其发育成某种组织。猴鼠嵌合体中体细胞的基因型_________(相同或不同)。

3)若想进一步提高胚胎的利用率,可采用_______________________技术,要注意的是_________________________,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

 

95%的空气和5%的CO2 抗生素 动物血清 内细胞团 不同 胚胎分割(移植) 将内细胞团均等分割 【解析】 1、胚胎移植的基本程序:对供体和受体的选择和处理(同期发情处理,超数排卵处理)、配种或进行人工授精、对胚胎的收集检查培养或保存、进行胚胎移植。用促性腺激素处理,既可以促进供体超数排卵,也可以对供、受体动物进行同期发情处理。 2、胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于早期胚胎或原始性腺(即囊胚期的内细胞团)。 特点:具有胚胎细胞的特性,体积较小,细胞核大,核仁明显;在功能上,具有发育的全能性,可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面,在体外培养条件下,ES细胞可不断增殖而不发生分化,可进行冷冻保存,也可以进行某些遗传改造。 (1)图中①体外培养时,应将培养皿或松盖培养瓶置于含95%的空气和5%的CO2 的混合气体的培养箱中进行培养。为了防止杂菌污染要在培养基中加入一定量的抗生素;而由于人们对细胞所需的营养物质还没有完全弄清楚,所以还要加入血清。 (2)囊胚已出现细胞分化,内细胞团将来发育成各种组织器官,故应将猴子的皮肤干细胞注射到小鼠囊胚的内细胞团部位,才能伴随其发育成某种组织。猴鼠嵌合体中体细胞的基因型不同。 (3)来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此可采用胚胎分割技术对胚胎进行分割,提高胚胎的利用率。要注意的是将内细胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
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考点分析:
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图表示用显微注射法导入目的基因获得转基因鼠的过程,据图回答。

1)培育转基因哺乳动物时,与用早期胚胎细胞作受体细胞相比,受精卵的优势是________________

2)受精卵可以从供体母鼠体内获得,也可以通过体外受精获得。

若受精卵细胞从供体母鼠体内获得,其基本过程是:首先对供体母鼠用促性腺激素进行______________处理,再通过自然交配或人工授精完成受精,最后从供体母鼠体内___________中获得受精卵。

若受精卵通过体外受精,基本操作过程包括_____________、卵母细胞的采集和培养及受精。卵母细胞受精的标志是_________________

3)过程表示受精卵一般经过体外培养至___________________时期,再移植到受体母鼠体内。外来胚胎与受体母鼠子宫建立正常的生理和组织联系,并存活的原因是_________________

 

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1表示抗体的基本结构,VL是轻链可变区,VH是重链可变区。不同抗体可变区不同。杂交瘤技术的出现使抗体的制备进入了单克隆时代,而20世纪90年代发明的噬菌体抗体库技术为单抗的制备开辟了全新领域。图2表示人源性噬菌体抗体生产过程流程图。

请回答下列问题:

1)运用杂交瘤技术制备单克隆抗体,用特定的选择培养基筛选获得杂交瘤细胞后,再经过___________________,目的是筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。与常规的血清抗体相比,单克隆抗体最大的优越性是___________________

2)在免疫过程中,需要向健康人体注射特定抗原(如乙肝疫苗),并且每隔一周重复注射一次,重复注射的目的是______________________________________

3)过程①使用了RT-PCR技术,与常规PCR技术相比较,RTPCR增加了_____过程。

4)从人源性噬菌体抗体生产过程分析,含抗体基因片段最终需要整合到_________中。

 

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下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:

限制酶

EcoR

BamH

Sau3AI

Sma

识别序列及切割位点

 

1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割后,含有_______个游离的磷酸基团。

2)根据限制酶识别和切割的位点,应选择_________________酶对质粒和含目的基因的外源DNA进行切割。用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒,不能用BamH Ⅰ切割,原因是____________________________________________

3)通过PCR技术扩增目的基因时,加入的引物有AB两种,引物AB序列设计的依据是_______________________,若该目的基因扩增4代,则需要消耗引物A____________个。

4)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入DNA连接酶,若只考虑DNA切段两两连接,则混合物中将形成_______种环状DNA。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了__________________________________

 

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关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是(   

A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯溶解

C.等培养基冷却至40℃左右时进行倒平板,待平板冷却凝固后倒过来放置

D.牛肉膏和蛋白胨都能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素

 

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辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域,其获得途径如下图所示。下列叙述正确的是(   

A.①表示辣椒组织培养中细胞的脱分化,需避光处理

B.②过程中需用适宜配比的生长素和细胞分裂素溶液处理

C.③过程常用的酶是纤维素酶和果胶酶

D.图中脱毒苗和高产细胞系的获得都体现了植物细胞的全能性

 

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