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某研究所以马尾藻岩藻聚糖(SF)为研究对象,体外培养小鼠肉瘤细胞S180,做抗肿...

某研究所以马尾藻岩藻聚糖(SF)为研究对象,体外培养小鼠肉瘤细胞S180,做抗肿瘤活性实验的研究。下列为部分实验步骤与结果。

实验步骤:

①将S180肿瘤细胞以RPMI1640为培养液,在5%CO2培养箱中培养。

②将上述培养过的S180肿瘤细胞经酶消化,按1×1031×105·mL-1接种到96孔培养板,适宜条件下培养24h48h72h96h后,以MTT法(又称比色法,一种检测细胞存活和生长的方法)于波长490nm处测定OD值,结果如图1

在适宜的培养条件和恰当的S180肿瘤细胞接种浓度下,研究不同浓度(0mg·mL-101mg·mL-105mg·mL-11mg·mL-12mg·mL-14mg·mL-18mg·mL-110mg·mL-115mg·mL-120mg·mL-125mg·mL-130mg·mL-1)的SFS180肿瘤细胞增殖的抑制情况,96h后以MTT法于波长490nm处测定OD值,结果如图2

请回答下列问题:

1)步骤中以RPMI1640为培养液培养S180肿瘤细胞的原理是__________。培养液中除细胞所需的营养物质之外,通常还添加一定量的__________,以防培养过程中的污染。

2)步骤消化所使用的酶是__________,为减少OD值测定的误差,应注意__________

3)已知在一定细胞数目范围内,MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关,由图1可知步骤中恰当的S180肿瘤细胞接种浓度为__________·mL-1

4)图2实验结果表明,在一定范围内SF浓度与细胞增殖的抑制作用呈__________(选填正相关负相关),当SF浓度达到__________mg·mL-1时细胞增殖的抑制作用达到极限,继续增加SF浓度对细胞增殖的抑制作用变化不明显。

 

细胞增殖 抗生素 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) 多测量,取平均值 5×103 正 25 【解析】 (1)动物细胞培养的原理:细胞增殖。动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养;动物细胞培养需要满足以下条件:①无菌、无毒的环境:培养液和培养用具应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加定量的抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。在使用合成培养基时通常需加入血清、血浆等一些天然成分。③温度和PH。④气体环境:细胞所需的气体主要是O2和CO2。 (2)根据题干信息,在一定细胞数目范围内,MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关,图2表示S180肿瘤细胞在不同浓度SF作用下生长曲线,SF浓度越大OD值越小,肿瘤细胞的数量越少,说明SF抑制肿瘤细胞的增殖。 (1)培养肿瘤细胞的原理是细胞增殖。培养液中除细胞所需的营养物质之外,通常还添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。 (2)步骤②中“消化”所使用的酶是胰蛋白酶,其作用是使动物组织细胞分散开,以获得细胞悬液。在实验中求平均值可以减少实验误差,所以为减少OD值测定的误差,应注意多次测量并求平均值。 (3)已知在一定细胞数目范围内,MTT法测得的OD值与活细胞数量呈正相关,所以由图1可知步骤③中恰当的S-180肿瘤细胞接种浓度为5×103个·mL-1。 (4)图2实验结果表明,在一定范围内,SF浓度与细胞增殖的抑制作用呈正相关,当SF浓度达到25mg·mL-1时细胞增殖的抑制作用达到极限,继续增加SF浓度对细胞增殖的抑制作用变化不明显。
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为防治荔枝蝽等植食性害虫,减少农药的使用,有人对比研究了荔枝山绿豆复合种植园和荔枝单一种植园中各类昆虫所占的百分比(图甲),图乙表示复合种植园生态系统中各成分之间的联系,图丙表示能量流经F营养级的示意图(abc表示能量)。请据图回答:

1)据图甲分析,复合种植园中害虫明显减少,原因是肉食性和寄生性昆虫的比例增加,通过_____等种间关系,降低了植食性昆虫的种群密度。

2)图乙中缺少的箭头是__________(用图中字母加箭头表示)。

3)图丙中能量b用于__________。若被F摄入的能量为m千焦,其粪便量中的能量为n千焦,c1中的能量为e千焦,b的能量为f千焦,则最终流入最高营养级的能量最多为__________千焦。

 

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甲状腺是成人最大的内分泌腺。甲状腺机能亢进(甲亢)、甲状腺炎等是常见的甲状腺疾病,血清中甲状腺激素含量是甲状腺疾病的主要诊断标准。某医院对甲、乙两位患者初步诊断均表现为血清甲状腺激素水平明显升高。为进一步查明病因,医生对这两名患者进行了131I摄入率检查,即让患者摄入131I24h,测量其体内的相关物质含量,结果如下表(“正常人”数据为历史参考值):

受检对象

血清中的131I

甲状腺内贮存的

131I-甲状腺激素

甲状腺内贮存的

无放射性甲状腺激素

血清

131I-甲状腺激素

正常人

中等

中等

中等

 

 

1)患者甲的甲状腺细胞对131I的摄入率___________(“高”、“适中”、“低”),进一步检测发现其促甲状腺激素受体的抗体(TRAb)水平明显升高,推测该抗体对甲状腺功能具有___________(“促进”或“抑制”)作用,且甲状腺激素对该抗体的产生___________(“存在”或“不存在”)负反馈调节。

2)患者乙的甲状腺激素合成功能___________(“增强”、“不变”或“减弱”),推测其血清中总甲状腺激素水平升高的最可能原因是______________________

 

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1981年经Anderson等人测定,人类线粒体基因组为裸露双链环状DNA,且可以是多拷贝的。下图为人类线粒体DNA和核DNA的协同作用示意图。请据图回答下列问题:

1)过程需要的酶是___________,与过程相比,过程特有的碱基配对方式是___________

2)线粒体DNA编码线粒体中少部分蛋白质和全部的tRNArRNA,其中所需的酶均由核DNA编码并以前体蛋白的形式转入线粒体,则RNA聚合酶发挥作用的场所有___________α鹅膏蕈碱能特异性的抑制过程,则图中受影响的过程有___________(填序号)。

 

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土壤中含有能将难溶性磷酸盐转变成植物可以吸收利用的可溶性磷的优良解磷菌株Q。下图1表示制备固体培养基过程中的某操作,图2是科研人员从土壤中分离出菌株Q的部分过程示意图。

1)图1所示操作后,待平板冷凝,然后___________,以防止___________

2)图2所示接种方法是___________。在3个平板上分别接入01mL稀释液,经适当培养后,3个平板上菌落数分别是384240,则1g土壤中的活菌数约为___________个。

3)固体培养基中难溶性磷酸盐在菌株Q的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解难溶性磷酸盐的能力大小。下表是初步筛选出的三种优良解磷菌株。

菌株

透明直径(D

菌落直径(d

M-3-01

188

123

B3-5-6

207

80

T4-0-1

91

65

 

 

根据实验结果分析,溶解难溶性磷酸盐能力最强的菌株是___________

 

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科研人员研究了镉(Cd)胁迫对能源作物甜高粱生理特性的影响及施钙的缓解效应。他们将培养20d后的甜高粱幼苗随机分成3组,分别进行3种处理CK(对照)、Cd022mmol·L-1Cd)、Ca30mmol·L-1Ca02mmol·L-1Cd),测定处理15d30d后的幼苗叶绿素总量,并观察30d时甜高粱叶肉细胞叶绿体的超微结构,结果如下图。

1)测定叶绿素总量首先需要用无水乙醇提取色素,其原理是____________________

2)由图1可知,镉胁迫造成叶绿素含量降低,导致光反应产生的___________减少,直接影响暗反应中___________(过程);结合图2分析,叶绿素含量降低的原因是___________

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