Question

β-胡萝卜素具有很高的营养价值，广泛用作食品，饮料的添加剂。利用A菌能产生β-胡萝卜素可缓解β-胡萝卜素不足的现状。请回答：

（1）若用固定化酶技术固定A菌，和发酵相比，其优点是____________，且利于产物的纯化；固定化A菌细胞常用____________法固定化。鉴定A菌代谢产物中是否含有β-胡萝卜素的方法叫____________。

（2）稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，分离不同的微生物需要不同的稀释倍数，原因是____________。

（3）与固体培养基相比，液体培养基更有利于A菌的生长繁殖，原因是：____________。

（4）将收集的A菌菌体挤干水分，烘干，然后用有机溶剂萃取β-胡萝卜素。选用氯仿和石油醚而不选用乙醇和丙酮进行萃取，原因是____________。研究发现，在其他条件相同时，萃取温度过高或时间过长都会使β-胡萝卜素的收率（萃取获得量）下降，原因可能是________________________。

Answer

可重复利用 包埋 纸层析法 （单位体积）土壤中不同种类的微生物数量不同 菌体与培养基接触充分，利于菌体获取营养 乙醇和丙酮为水溶性有机溶剂，与水混溶 萃取温度过高，萃取时间过长会破坏β—胡萝卜素

【解析】

1、固定化酶和固定化细胞技术是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间内的技术，包括包埋法、化学结合法和物理吸附法。由于细胞体积较大，而酶分子很小；体积大的细胞难以被吸附或结合，而体积小的酶容易从包埋材料中漏出，故酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。

2、用萃取法提取胡萝卜素，萃取剂的特点是具有较高的沸点，能充分溶解胡萝卜素，且不与水混溶；此外还应该考虑萃取效率、对人的毒性、是否易燃、有机溶剂是否能从产品中完全除去、会不会影响产品质量等。

（1）固定化酶技术固定的A菌，和一般的发酵相比，其优点是可重复利用，且利于产物的纯化。固定化A菌细胞常用包埋法固定化。β-胡萝卜素的鉴定方法是纸层析法。

（2）土壤中不同种类的微生物数量不同，分离不同的微生物需要不同的稀释倍数。

（3）液体培养基由于菌体与培养基接触充分，利于菌体获取营养，相比固体培养基更有利于其生长繁殖。

（4）萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，乙醇和丙酮为水溶性有机溶剂，与水混溶，因此萃取β-胡萝卜素时不选用乙醇和丙酮。萃取温度过高，萃取时间过长会破坏β—胡萝卜素。