Question

2018年1月25日，《细胞》杂志报道了我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，作为研究癌症等人类疾病的动物模型。如图为体细胞核移植技术培育食蟹猴的操作过程，请回答下列问题：

（1）2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴。获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是____________________________。

（2）进行过程①时，为提供成纤维细胞培养所需的无毒环境，应进行的实验措施是需定期_________，其目的是__________________。

（3）据图分析，过程③是利用______法将成纤维细胞注入猴去核的MⅡ中期卵母细胞。

（4）图中过程⑤的实质是早期胚胎在______条件下空间位置的转移。

（5）上述实验的突破之处是使用了去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA，在确定其作用时，研究人员用正常培养液培养融合细胞得到A组实验数据，用正常培养液培养注入去甲基化酶（Kdm4d）mRNA的融合细胞得到B组实验数据。图中X为融合细胞发育成的胚胎数、Y为囊胚数、Z为内细胞团数。分析实验数据可知，Kdm4d的mRNA的作用是既能提高___________，又能提高___________________。

Answer

体细胞分化程度高，恢复其全能性较难 定期更换培养液 防止成纤维细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害 显微注射 相同生理 融合细胞发育成囊胚的成功率 囊胚中内细胞团的形成率

【解析】

细胞核移植技术，就是将供体细胞核移入除去核的卵母细胞中，使后者不经过精子穿透等有性过程即无性繁殖即可被激活、分裂并发育成新个体，使得核供体的基因得到完全复制。以供体核的来源不同可分为胚细胞核移植与体细胞核移植两种。细胞核移植，就是将一个细胞核用显微注射的方法放进另一个细胞里去。前者为供体，可以是胚胎的干细胞核，也可以是体细胞的核。受体大多是动物的卵子。因卵子的体积较大，操作容易。

（1）体细胞分化程度高，恢复其全能性较难，因此获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植。

（2）进行过程①时，为提供成纤维细胞培养所需的无毒环境，应进行的实验措施是需定期 定期更换培养液，其目的是防止成纤维细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害。

（3）据图分析，动物细胞核移植常用显微注射法进行，过程③是利用显微注射法将成纤维细胞注入猴去核的MⅡ中期卵母细胞。

（4）图中过程⑤的实质是早期胚胎在相同生理（同期发情处理）条件下空间位置的转移。

（5）A组为对照，用正常培养液培养注入去甲基化酶（Kdm4d）mRNA的融合细胞得到B组实验数据。分析实验数据可知，Kdm4d的mRNA的作用是既能提高融合细胞发育成囊胚的成功率，又能提高囊胚中内细胞团的形成率。