Question

利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过核移植技术培育基因编辑猪，可用于生产基因工程疫苗。如图为基因编辑猪培育流程，请回答下列问题：

（1）对 1 号猪使用_____处理，使其超数排卵。选取处在_____时期的卵母细胞，去核后用于核移植，原因可能是_________。

（2）采集 2 号猪的组织块，用_____或_____处理获得分散的成纤维细胞，放置于37℃的 CO₂ 培养箱中培养。通常选择 10 代以内的成纤维细胞用于核移植的供体细胞，原因是_____。

（3）产出的基因编辑猪的性染色体来自于______号猪，基因编辑猪的的产生过程是_____（填“有性生殖”或“无性生殖”）。

（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入 4 号猪，可采用的方法有_____。

Answer

促性腺激素 减数第二次分裂中期 卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核发育的物质 胰蛋白酶 胶原蛋白酶 保持细胞正常的二倍体核型 2 无性生殖 DNA 测序技术（DNA 分子杂交技术）

【解析】

基因编辑是指对基因组进行定点修饰的一项新技术。利用该技术，可以精确地定位到基

因组的某一位点上，在这位点上剪断靶标DNA片段并插入新的基因片段。此过程既模拟了基因的自然突变，又修改并编辑了原有的基因组，真正达成了“编辑基因”。

动物细胞培养过程

取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触抑制的细胞重新使用胰蛋白酶处理。再配成一定浓度的细胞悬浮液。另外，原代培养就是从机体取出后立即进行的细胞组织培养。

（1）图中1号猪的作用是提供卵母细胞，为了获得更多的卵母细胞，需要对其使用促性腺激素处理，促其超数排卵。通常选取处在减数第二次分裂中期时期的卵母细胞，去核后用于核移植，选择卵母细胞的原因是卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核发育的物质，从而促进细胞核全能性表现。

（2）图中2号猪是供核的个体，因此需要获取2号猪的组织块，然后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理获得单细胞悬液，置于37℃的 CO2 培养箱中培养。由于培养到10 代以内的细胞能保持细胞正常的二倍体核型，因此，通常选择10代以内的成纤维细胞作为用于核移植的供体细胞。

（3）根据图中的生产流程可知，产出的基因编辑猪的性染色体来自于2号猪，因为提供细胞核的细胞来源于2号猪，由于基因编辑猪的的产生过程没有经过两性生殖细胞的融合，因此基因编辑猪的生产过程属于无性生殖。

（4）检测目的基因是否导入受体细胞的方法是DNA分子杂交技术，因此，这里检测病毒外壳蛋白基因是否被导入 4 号猪应采用的方法为DNA 测序技术（DNA 分子杂交技术）。