Question

根据生物技术的相关知识，回答下列问题：

（1）果酒发酵结束后，为方便后续使用该菌种，对其进行长期保存，方法是_________。

（2）泡菜酸甜香脆，但其腌制过程中会产生亚硝酸盐。测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作包括：配制溶液、制备_________、制备样品处理液、比色。

（3）制作果汁时常加入果胶酶，因为果胶酶可以将果胶分解成可溶性的_________使果汁澄清。由于溶液中的酶很难回收，为了降低成本，使果胶酶能被再次利用一般采用物理吸附法或_________法将其固定。

（4）科研人员发现某种微生物中富含活性高的果胶酶，测定该果胶酶分子量时常用的方法是_________。

（5）下图是纯化时样品的加入与洗脱示意图，从图中可以看出，正确的加样操作是用吸管小心的将样品贴着管壁加样，正确的操作次序是_________（填序号）。

Answer

甘油管藏法 标准显色液 半乳糖醛酸 化学结合 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 ③①④②

【解析】

甘油在菌种冷冻保存时作为保护剂及防冻剂，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。加甘油是为了避免水结冰产生冰晶损伤细胞。在细胞和病毒的冻存过程中，会形成冰晶损伤和溶质损伤，加入甘油的目的是为了防止这两者对细胞和病毒的损伤。甘油还有隔绝空气、衡湿、调节渗透压、并在冷冻过程中起冷冻保护剂的作用。泡菜中亚硝酸盐的测定：试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫色染料，外标法（以待测成分的对照品作为对照物质，相对比较以求得供试品含量）测得亚硝酸盐含量。

（1）甘油管藏法可对菌种进行长期保存。

（2）测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作包括：配制溶液、制备标准显色液、制备样品处理液、比色。

（3）果胶酶可以将果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸使果汁澄清，增加果汁出汁率。采用物理吸附法或化学结合法将酶固定，使酶可以重复被利用，且有利于与产物的分离。

（4）科研人员发现某种微生物中富含活性高的果胶酶，测定该果胶酶分子量时常用的方法是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，依据蛋白质的大小进行分离。

（5）加样和洗脱的具体过程为：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质，因此正确的操作次序是③①④②。