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Ⅱ型糖尿病病因复杂,多数是胰岛素拮抗引起机体对胰岛素的敏感性降低。胰岛素单克隆抗...

Ⅱ型糖尿病病因复杂,多数是胰岛素拮抗引起机体对胰岛素的敏感性降低。胰岛素单克隆抗体可用于快速检测血清胰岛素的含量。请回答下列有关胰岛素单克隆抗体制备的问题:

1)首先需要将人胰岛素注射到健康成年小鼠体内,其目的是获取_____细胞;再将该细胞与_____相融合,以制取杂交瘤细胞。

2)细胞融合过程体现了细胞膜的特性是具有_____。融合完成后,融合体系中除含有未融合的细胞外,理论上含有_____种两两融合的细胞。

3)为检验得到的杂交瘤细胞能否分泌胰岛素抗体,可用_____与从杂交瘤细胞培养液中提取的抗体杂交。在体外条件下,当培养的小鼠杂交瘤细胞达到一定密度时,需进行_____培养以得到更多数量的细胞。

4)细胞融合技术的优点是_____________

 

能分泌抗人胰岛素抗体的 B 小鼠骨髓瘤细胞 流动性 3 人胰岛素 传代 突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能 【解析】 单克隆抗体的制备 (1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原,然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 (2)获得杂交瘤细胞①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合;②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 (3)克隆化培养和抗体检测。 (4)将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。 (5)提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 (1)胰岛素单克隆抗体制备,首先需要将人胰岛素注射到健康成熟小鼠体内,其目的是获取能分泌抗人胰岛素抗体的B细胞;再将该细胞与小鼠骨髓瘤细胞相融合,以制取杂交瘤细胞。 (2)细胞融合过程体现了细胞膜具有流动性的特性。细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞外,可能还有杂交瘤细胞、B细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞共3种两两融合的细胞。 (3)为检验得到的杂交瘤细胞能否分泌胰岛素抗体,可用人胰岛素与从杂交瘤细胞培养液中提取的抗体杂交。在体外条件下,当培养的小鼠杂交瘤细胞达到一定密度时,需进行传代培养以得到更多数量的细胞。 (4)细胞融合技术的优点是突破了有性杂交的局限,是远缘杂交成为可能。
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考点分析:
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絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀,起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果, 科研人员将絮凝性细菌和石油降解菌融合,以构建目的菌株。其流程如下。

据图回答:

1)溶菌酶的作用是_____PEG 的作用是_____

2)再生培养基从功能上来看是一种_____培养基:在该培养基上,未融合的AB 菌(经过相关处理)难以生长,AB 融合菌却能生长和繁殖的原因是_____

3)为探究目的菌株不同发酵时间对石油污水的絮凝效果,需_____提取发酵液, 检测发酵液中污染物的剩余量;该探究操作中对照装置内含有的是_________

4)目的菌株净化污水的大致过程是_____。从生态系统的成分来看,该菌株属于_____

 

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人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值,在临床上需求量很大,下图是通过基因工程技术获取 HSA 的两条途径,图中报告基因表达的产物能催化无色物质 K 呈现蓝色。据图回答下列问题:

1)若要体外获得大量的 HSA 基因,可采用 PCR 技术。该技术的原料是__________ 扩增的前提是要根据____________设计引物,而后经过变性、复性和延伸循环对目的基因进行扩增。若该目的基因循环扩增 5 次,理论上需要消耗_________个引物。

2)过程①需将植物细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让_________进入植物细胞;去除掉所有农杆菌后,过程②还须转接到含_____的培养基上筛选出转化的植物细胞。

3)要想通过转基因绵羊分泌的乳汁来生产 HSA,需将 HSA 基因与____________等调控组件重组到一起,过程③再通过___________方法将其导入绵羊受体细胞。

4)检测转基因绵羊的乳汁中出现 HSA 的方法是_________,若_________表明转基因绵羊体内出现了 HSA

 

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基因敲除是应用 DNA 重组原理发展起来的一门新兴技术。以小鼠为实验动物构建“基因敲除细胞”的过程如下:

第一步:从囊胚中分离出胚胎干细胞(ES),在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

第二步:构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因(同源臂),在同源臂上接入新霉素抗性基因等。由于同源臂与靶基因的 DNA 正好配对,所以能像“准星”一样, 将表达载体准确地带到靶基因的位置。

第三步:将表达载体导入胚胎干细胞,并与其内靶基因同源重组,完成胚胎干细胞的基因改造。

第四步:基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。基本原理如下图所示。

请根据上述资料,回答下列问题:

1)第一步分离出的 ES 细胞具体是由囊胚的_________分离培养获得,上述资料中的靶基因与目的基因的本质区别是_____

2)在把目的基因导入胚胎干细胞前,应首先完成_____,该过程中所需要的工具酶是_____,接入新霉素抗性基因的作用是_________

3)通过该技术获得一只含目的基因的小鼠,通过有性生殖产生的后代________(“是” 或“否”)都含该目的基因,原因是_____

 

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发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是(   

A.发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点

B.发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身

C.通常所指的发酵条件包括温度、溶氧、pH 和酶的控制

D.发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵

 

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某小组同学为调查湖水中细菌的污染情况而进行细菌培养实验,有关实验操作判断错误的是(   

A.培养基中加入蛋白胨的目的是为细菌提供氮源

B.对培养基进行干热灭菌操作是避免杂菌污染

C.上述操作获得细菌菌落的过程就是纯培养

D.菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越大

 

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