Question

下列关于基因工程中工具酶的叙述，正确的是（    ）

A.T₄DNA连接酶只能连接经限制酶切割产生的互补的黏性末端

B.大多数限制酶识别的某种特定序列由4、5或8个核苷酸组成

C.限制酶将一个DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子

D.限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶都是基因工程中的工具酶

Answer

C

【解析】

1、关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：

（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。

（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（3）结果：形成黏性未端或平未端。

2、DNA连接酶：

（1）根据酶的来源不同分为两类：E.coliDNA连接酶、T4DNA连接酶。这二者都能连接黏性末端，此外T4DNA连接酶还可以连接平末端，但连接平末端时的效率比较低。

（2）DNA连接酶连接的是两个DNA片段的磷酸二酯键。

（3）DNA连接酶和DNA聚合酶的区别：

①DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，而DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的核苷酸片段上，形成磷酸二酯键。

②DNA连接酶是同时连接双链的切口，而DNA聚合酶只是在单链上将一个个脱氧核苷酸连接起来；

③DNA连接酶不需要模板，而DNA聚合酶需要模板。

A、DNA连接酶连接的是两个DNA片段的磷酸二酯键，不一定是限制酶切断的，A错误；

B、大多数限制酶识别的某种特定序列由6个核苷酸组成，B错误；

C、限制酶将一个DNA分子片段切成两个片段需要水解两个磷酸二酯键，因此需消耗两个水分子，C正确；

D、DNA聚合酶不属于基因工程中的工具酶，D错误。

故选C。