Question

图1表示含有目的基因D的DNA片段和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 四种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为：C↓CGGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列分析中正确的是（    ）

A.限制酶MspI 和SmaI 的识别序列相同，切割后的产物也相同

B.要把图 2 中质粒和目的基因 D 拼接应选限制酶BamHI 和MboI

C.若用BamHI 切割图 2 质粒，则抗生素 B 抗性基因为标记基因

D.若图 1 用限制酶SmaI 完全切割后会产生 4 种不同的 DNA 片段

Answer

C

【解析】

在基因工程中，限制性内切酶作用对象是磷酸二酯键，能识别DNA中特定的碱基序列并在特定的位置将DNA双链切开成为DNA片段；而DNA连接酶将双链的DNA分子连接，作用对象是磷酸二酯键。

A、限制酶MspI 和SmaI 的识别序列不相同，切割后的末端也不同，切割后产生的产物化学本质相同，但其中的碱基序列不同，A错误；

B、目的基因的两侧是GGATCC序列，该序列是限制酶BamHI的识别序列，因此要把图 2 中质粒和目的基因 D 拼接成重组质粒，应应选限制酶BamHI切割，B错误；

C、若用BamHI 切割图 2 质粒，则抗生素A的抗性基因会被切割，则重组质粒中只能是抗生素 B 抗性基因为标记基因，C正确；

D、图 1中的DNA片段含有两个限制酶SmaI的切割位点，若用限制酶SmaI 完全切割图1中的DNA片段，会产生 3种不同的 DNA 片段，D错误。

故选C。