Question

下列对大肠杆菌进行划线分离的操作，正确的是（    ）

A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中就不用再灭菌

B.打开含菌种的试管取出菌种后马上塞上棉塞

C.只需将沾有菌种的接种环在平板内划3～5条平行线即可

D.最后将平板倒置，放入恒温培养箱中培养

Answer

D

【解析】

平板划线法是指把混杂在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞，用接种环在平板表面上多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。通过反复划线分离，可获得微生物的纯种。

A、接种环在使用过程中需要多次灭菌，第一次灭菌是为了杀死其它微生物，每次划线结束后需要灭菌是为了杀死上次残留的菌种，A错误；

B、打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，接种后还需要通过火焰灭菌后再塞上棉塞，B错误；

C、将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上培养皿盖，再次灼烧接种环，冷却后从第一区域划线末端开始往第二区域划线，重复以上操作，在三、四、五区域内划线，C错误。

D、最后将平板倒置，防止培养皿盖上水滴落引起污染，放入恒温培养箱中培养，D正确。

故选D。