Question

若要利用某目的基因(见图甲)和P₁噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A^↓GATCT)、EcoRⅠ(G^↓AATTC)和Sau3AⅠ(^↓GATC)。下列分析合理的是(　　)

A.用EcoRⅠ切割目的基因和P₁噬菌体载体

B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P₁噬菌体载体

C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P₁噬菌体载体

D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P₁噬菌体载体

Answer

D

【解析】

A、用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体，产生相同的黏性末端，用DNA连接酶连接时可能会发生反向连接，故A项错误；

B、用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因会产生两种DNA片段，一种含有目的基因，一种不含目的基因（该片段相当于只用EcoRⅠ切割），故B项错误；

C、用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，也能产生相同的黏性末端，可能会发生反向连接，故C项错误；

D、只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，才能产生不同的黏性末端，防止发生反向连接，这样目的基因插入运载体后，RNA聚合酶的移动方向肯定与图丙相同，故D项正确。

故选D。