Question

金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物，可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。如图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答相关问题。

(1)按细胞结构分类，金黄色葡萄球菌属于________生物，从培养过程分析，金黄色葡萄球菌可进行________呼吸。

(2) 7.5％NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括___________________，用该培养基进行选择培养的主要目的是_______________________。

(3)操作中在血平板上的接种方法是________，接种操作前后需要对接种工具进行________ 灭菌。

(4)在制备血平板时需将pH调节至________(“微酸性”或“微碱性”)后灭菌，待培养基________后，再加入适量血液。按培养基功能分类，血平板属于________培养基。

(5)经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现________________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带，因此，要对本操作进行完善，完善的方案是_________________________ 。

Answer

原核 有氧 碳源、氮源、水和无机盐 增加金黄色葡萄球菌的数量 平板划线法 灼烧 微碱性 冷却 鉴别 周围存在透明圈 设置不加鲜牛奶其他操作均相同的对照组

【解析】

微生物的营养物质有5类，分别是水、无机盐、碳源、氮源及生长因子。培养基按功能分为选择培养基和鉴别培养基：①选择培养基：培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物生长，培养、分离出特定的微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度的食盐）；②鉴别培养基：根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品，鉴别不同种类的微生物，如可用伊红-美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）。在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

（1）如何判断细菌：带“菌”字的生物中，“菌”字前有“杆”“球”“弧”“螺旋”等表示形态的字的都是细菌，如大肠杆菌、肺炎双球菌、葡萄球菌、霍乱弧菌等都是细菌，葡萄球菌属于细菌，属于原核生物；在培养的过程中由于没有密闭培养，所以葡萄球菌属于有氧呼吸的菌种。

（2）7.5%NaCl肉汤培养基中含有蛋白质，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化钠，所以提供的营养物质为碳源、氮源、水和无机盐；高浓度的盐溶液可以对微生物进行选择，而葡萄球菌可以生存在高浓度的盐溶液中。

（3）题图中的接种过程使用接种环进行接种，此接种方法是平板划线法；操作前后对接种环的灭菌方式是灼烧灭菌。

（4）血液是微碱性的，为维持红细胞的正常形态，在制备血平板时需将pH调节至微碱性后灭菌，为防止高温破坏血细胞，灭菌后的培养基应在冷却后，再加入适量血液；由于该培养基能够鉴别是否含有葡萄球菌，所以属于鉴别培养基。

（5）由题干“金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色”，所以如果经多次规范操作、重复实验，血平板上均出现透明圈的菌落，说明初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌；要进一步证明金黄色葡萄球菌来自鲜牛奶，需要对本实验进行完善，即需要设计对照实验，对照组实验的设计是在培养基中不加鲜牛奶而其它操作均相同。