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人绒毛膜促性腺激素(HCG)是妊娠后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG...

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是妊娠后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于检测早孕。图甲是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图,其中XY表示细胞,af表示操作过程。图乙是医学上定量检测抗原的双抗体夹心法原理示意图,需先将抗体固定并与受检抗原结合形成复合物,再加酶标抗体和底物,加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检抗原的量直接相关,根据颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,从而使测定方法达到很高的敏感度。回答下列问题。

1a过程中培养的Y细胞是____________b过程中常用____________________________________等方法诱导细胞融合,d所示操作的目的是____________

2e过程培养的细胞,首先应保证其处于________________的环境,其次还需要提供充足的营养等条件,其中加动物血清的目的是____________

3)用双抗体夹心法检测抗原数量,酶标抗体的作用是________________________。若现有三种抗HCG单克隆抗体,分别记为ABC。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行____________组实验,检测并比较各组实验的产物量,以便得出结论。

 

骨髓瘤细胞 灭活的病毒 聚乙二醇 电激 获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞 无菌、无毒 补充配制的培养基中缺乏的营养成分及一些激素等促进细胞生长的物质 与待测抗原结合 催化检测底物反应 6 【解析】 1、单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内,使其发生免疫,小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,单克隆抗体制备过程中的两次筛选:第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为B淋巴细胞,B为骨髓瘤细胞),不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选:利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选,获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 2、单克隆抗体的作用:①作为诊断试剂:(最广泛的用途)具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症,可制成“生物导弹”。 (1)根据图示可知,从小鼠体内提取的X为经过免疫的浆细胞,则Y为骨髓瘤细胞,诱导二者融合形成杂交瘤细胞常用灭活的病毒、聚乙二醇、电激等方法。融合后的细胞需要经过c过程的初次筛选和d过程的抗体检测和克隆化培养,故d所示操作的目的是获得能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。 (2)e过程为体外培养动物细胞,首先应保证其处于无菌、无毒的环境,其次还需要提供充足的营养等条件,其中加动物血清的目的是补充配制的培养基中缺乏的营养成分及一些激素等促进细胞生长的物质。 (3)酶标抗体的作用是与待测抗原结合;酶能催化检测底物反应,可通过测定酶反应的产物量来判断待测抗原量。研究人员获得三种抗HCG单克隆抗体,分别记为A、B、C,为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行6组实验,分别是AA、BB、CC、AB、AC、BC,检测并比较各组实验的产物量。
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考点分析:
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I.玉米是重要经济作物,常受到玉米螟危害而减产。研究人员发现玉米螟若食用某种原核生物分泌的γ-蛋白后将会死亡,由此他们将γ-蛋白基因转入到玉米体内,使玉米获得抗玉米螟危害的能力.回答下列问题:

1)若用限制酶EF从原核生物基因组DNA上切下γ-蛋白的基因,并将之取代质粒Zl上相应的E-F区域(04kblkb=1000对碱基)。图中EFGH4种识别序列完全不同的限制酶及其部分识别位点,已知用限制酶G切割Zl,可得到25kbDNA片段,用限制酶EF切割Zl时,可得到04kb46kbDNA片段。

①质粒Zl上有____个限制酶G的酶切位点,若图中所形成的重组质粒Z2的大小为54kb,则目的基因的大小是_____________________

②若用含重组质粒的土壤农杆菌直接感染玉米植株根部伤口,则该植株产生的种子中______(填“含有”或“不含”)γ-蛋白基因。

2)将获得的目的基因在体外大量扩增,可以用PCR技术,DNA的两条链是反向平行的,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的_______________(填“3”或“5”)端开始延伸DNA链。  PCR反应体系中加入dNTP(三磷酸碱基脱氧核苷酸,结构与ATP类似)后,不再单独添加ATP等能源物质,请推测其原因是____________

3)下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程,下列叙述错误的是_____

A.从理论上推测,第二轮循环产物中含有引物ADNA片段占3/4

B.在第二轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段

C.引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因

DPCR的反应过程需要耐高温的解旋酶和聚合酶

II.基因疫苗指的是DNA疫苗,即将编码外源性抗原的基因插入到质粒上,然后将质粒直接导入人或动物体内,让其在宿主细胞中表达出抗原蛋白,诱导机体产生免疫应答。口蹄疫是一种危害严重的偶蹄动物传染病,近年来国内外在口蹄疫基因疫苗研究方面有了许多新的突破。回答下列问题:

1)将编码外源性抗原的基因插入到质粒上,此过程目的是___________________

2DNA疫苗导入宿主细胞后首先经过__________过程表达出抗原蛋白,然后由抗原蛋白诱导机体产生免疫应答。

 

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如图为制备单克隆抗体的过程,下列有关叙述不正确的是(   

A.上述过程应用了细胞工程中的动物细胞融合、动物细胞培养两大技术

B.用特定的抗原多次注射免疫小鼠主要目的是刺激小鼠机体产生更多的抗体

C.A步骤需要用特定的选择培养基对多种类型的细胞进行初次筛选

D.用单克隆抗体制成携带抗癌药物的生物导弹具有特异性强、毒副作用小特点

 

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生态系统内,即使某个物种由于某种原因死亡,也会很快有其他物种占据它原来的生态位置,从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的(   

A.物种多样性原理 B.协调与平衡原理

C.系统整体性原理 D.物质循环再生原理

 

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下列有关生态工程的说法,正确的是

A.“无废弃物农业”主要体现了系统学和工程学原理

B.单一种植的樟子松林违背了物种多样性原理

C.生态工程最终的目的是追求经济效益最大化

D.生态工程是一种无污染、多效益的工程体系

 

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科学家以PLRV(马铃薯卷叶病毒)感染的马铃薯试管苗为实验材料,对不同大小的茎尖超低温处理后,用植物组织培养技术进行再生培养。选取培养18周的20棵植株进行检测并获得病毒保存率,实验结果如下表所示。下列叙述正确的是(   

病毒感染类型

茎尖大小/mm

病毒保存率/%

PLRV

05

00/20

15

357/20

 

注:括号内数字表示检测阳性样本量/检测总样本量。

A.超低温处理后再生培养时培养基中应加人有机碳源和激素等

B.茎尖脱分化培养获得愈伤组织包裹人工种皮可获得人工种子

C.该技术能克服不同生物远缘杂交不亲和障碍从而培育出新品种

D.15mm的茎尖超低温脱毒效果优于05mm的茎尖超低温脱毒效果

 

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