Question

实验室欲采取措施加快某动物优良性状的繁殖，根据所学知识，回答下列问题：

（1）若想选用动物细胞核移植技术，应先从具有优良性状的动物身上获取其体细胞中的______，然后将其导入_______的卵细胞中，若想要使后代尽可能保留优良性状，则___________，激活重组细胞活性采用的技术是___________________。

（2）若采用试管牛的工厂化生产方式进行繁殖，先从公牛体内取出精子后用钙离子A23187溶液处理，处理的目的是_____________，同时为让母牛进行超数排卵，需要给母牛注射___________，待精卵发育形成受精卵后需要通过_______________将其导入母牛体内。

（3）如需对初期胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的__________细胞进行鉴定。

（4）在重组细胞进行早期培养时，需向培养箱中通入CO₂，其主要作用是____________。

（5）在胚胎工程中，常需进行冲卵，冲卵冲出的_________（是或不是）卵子。

（6）如想继续获得转基因牛，需将目的基因导入_______中，常用的方法为__________ 。

Answer

细胞核 去核 应将体细胞直接注入去核的卵母细胞 电脉冲刺激（钙离子载体、乙醇、蛋白酶、合成抑制剂） 让精子获能 促性腺激素 胚胎移植 滋养层细胞 维持培养液的PH 不是 受精卵 显微注射法

【解析】

1.在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和化学诱导法两种：对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精子，一般采用培养法，即将取自附睾的精子，放入人工配制的获能液中，培养一段时间后，精子就可获能；对于牛、羊等家畜的精子常采用化学法，即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，用化学药物诱导精子获能。

2.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件。

（1）无菌、无毒的环境。首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，即对培养液和所有培养用具进行无菌处理。

（2）营养。细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。

（3）温度和pH。细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近，哺乳动物多以36.5±0.5C为宜。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。

（4）气体环境。进行细胞培养时，通常将培养瓶置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。

（1）若想选用动物细胞核移植技术，应先从具有优良性状的动物身上获取其体细胞中的细胞核，然后将其导入去核的卵细胞中。若想要使后代尽可能保留优良性状，则应将体细胞直接注入去核的卵母细胞形成重组细胞，用物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重组细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。

（2）若采用试管牛的工厂化生产方式进行繁殖，先从公牛体内取出精子后用钙离子A23187溶液处理，诱导精子获能，同时需要给母牛注射促性腺激素，让母牛进行超数排卵。待精卵发育形成受精卵后需要通过胚胎移植将其导入母牛体内。

（3）囊胚外表为滋养层，能发育形成胚胎的附属结构或胚外结构，如胚盘。囊胚内细胞团的细胞为胚胎干细胞，是一种未分化的细胞，具有发育全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官。由于取滋养层细胞进行性别鉴定基本上不会对胚胎发育造成影响，因此宜取囊胚期的滋养层细胞进行性别鉴定。

（4）在重组细胞进行早期培养时，需向培养箱中通入CO2，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

（5）在胚胎工程中，常需进行冲卵，冲卵冲出的是早期胚胎，不是卵子。

（6）如想继续获得转基因牛，需将目的基因导入受精卵中，常用的方法为显微注射法。