Question

土壤有“微生物的天然培养基”之称。土壤中的微生物数量最大、种类最多。下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述不正确的是（    ）

A.将土壤稀释液涂布于各组平板上

B.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板

C.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数

D.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24~48小时

Answer

C

【解析】

统计菌落数目的方法：
（1）显微镜直接计数法
①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法（活菌计数法）
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性。
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
③计算公式：每克样品中的菌株数＝（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。

A、测定土壤中细菌总数利用稀释涂布平板法，即取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上，A正确；
B、用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板，B正确；
C、确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300之间的实验组平板进行计数，C错误；
D、将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时，D正确。
故选C。