Question

2016年4月27日，抚州市中心城区创建国家卫生城市工作正式启动，力争在2017年成功创建国家卫生城市。 “卫生城市”是一个城市综合功能和文明程度的重要标志。某同学欲利用所学习的微生物培养知识，通过实验证明痰液中含有细菌，来倡导同学们不要随地吐痰，为 “创卫”添一份力。请回答下列问题：

（1）欲培养细菌必须先制备可供细菌生长的培养基。实验室中常用牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养微生物，该培养基的组成成分包括牛肉膏、蛋白胨、NaCl、______、H2O等；该培养基中微生物所需的氮源来自_________，制备该培养基的步骤是：计算-称量-溶化-灭菌-倒平板，其中灭菌常用的方法是________；培养基灭菌后，需要冷却到____℃左右才能倒平板，等平板冷凝后，还需要将平板倒置，主要目的是_________________。

（2）为了使实验更有说服力，某同学设置空白对照组和若干实验组，其中对照组的作用是________ 。若在某次调查中，某一实验组平板上的平均菌落数为39个，而空白对照组的平板上出现T9个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了_____现象。

（3）某同学利用稀释涂布平板法来统计样品中细菌的数目，统计结果往往比实际细菌的数目要低，主要原因是________________________________________。

Answer

琼脂 牛肉膏、蛋白胨 高压蒸汽灭菌法 50 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染 排除实验组中非测试因素对实验结果的影响 污染 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

【解析】

培养基的营养构成：①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐；②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项：①倒平板的温度一般50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固；②平板需倒置，防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

（1）配制固体培养基时，需加入凝固剂，常用的凝固剂是琼脂。观察培养基的成分，微生物所需的氮源为牛肉膏、蛋白胨。对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。倒平板的温度通常要冷却到50℃左右。由于平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，因此为了防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，应将平板倒置。

（2）设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。在操作正确的情况下，空白对照组中不应出现菌落，若出现菌落，则说明操作过程中存在污染。

（3）由于稀释涂布平板法统计的是活菌数，不能统计死菌，因此当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此此方法统计的结果比实际数要小。