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人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗H...

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:

1)制备单克隆抗体过程中要用到________________________技术。

2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于_______,使小鼠产生能分泌相应________ _________细胞,此过程属于特异性免疫中的_______ 免疫。

3)在细胞内DNA合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的____________ 成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_____________________________

4)此过程生产的单克隆抗体可以与____________ 特异性结合,从而诊断早孕。

 

动物细胞培养 动物细胞融合 抗原 抗体 浆(B)细胞 体液 氨基嘌呤 能无限增殖并分泌特异性抗体 人绒毛膜促性腺激素(或“HCG”) 【解析】 1、单克隆抗体:由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高,并可能大量制备的特点。 2、单克隆抗体的制备过程:首先用特定抗原注射小鼠体内,使其发生免疫,小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞。利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,单克隆抗体制备过程中的两次筛选:第一次筛选:利用特定选择培养基筛选,获得杂交瘤细胞,即AB型细胞(A为B淋巴细胞,B为骨髓瘤细胞),不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选:利用多孔板法和抗原-抗体杂交法筛选,获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 3、单克隆抗体的作用:①作为诊断试剂:(最广泛的用途)具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症,可制成“生物导弹”。 (1)制备单克隆抗体过程中要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。 (2)如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,给小鼠注射的HCG相当于注射抗原,使小鼠产生分泌抗HCG抗体相应的浆细胞,此过程属于特异性免疫中的体液免疫。 (3)①氨基嘌呤可以阻断在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,因此配制的HAT培养基中添加氨基嘌呤的成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。 ②杂交瘤细胞的特点:既能大量增殖,又能产生特异性抗体。 (4)此过程生产的单克隆抗体可以与人绒毛膜促性腺激素(或HCG)特异性结合,从而诊断早孕。
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1表示含有目的基因DDNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列,现有MspIBamHIMboISmaI 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为CCGGGGATCC、↓GATCCCCGGG,请回答下列问题:

1)若用限制酶SmaI完全切割图1DNA片段,其产物长度为_____________

2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaI完全切割,产物中共有____种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过_________技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。

3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加_________的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含____________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。

4)假设用BamHI切割DNA获取目的基因,用MboI切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHI? _____(能,不能,不一定)。因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处_______________

 

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目前我国在矿产资源开发中,坚持“谁污染、谁治理”“谁破坏、谁恢复”的原则,建立健全矿区生态环境恢复治理的责任机制。下列关于矿区废弃地生态恢复的叙述,合理的是

A.矿区废弃地生态修复的关键是尽可能依靠自然演替恢复其生态功能

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下图是一个农业生态系统模式图,关于该系统的叙述中,正确的是

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Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,可以利用PCR技术检测其转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。如图为克隆猪的培育及Bcl-2基因转录水平检测流程,下列说法错误的是(   

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