人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图所示:
回答下列问题:
(1)如图所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为____________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是_______________________。
(2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行______________处理。
(3)SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系进行扩增,然后对扩增产物进行检测是否含SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段。
①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有____________;其中,dNTP的作用是既能提供合成DNA的原料,又能____________,引物应选用如图2中的___________(填下图中标号)。
②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞_______(填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。
(4)早期胚胎发育的过程大致为:受精卵→ ________→囊胚→原肠胚,囊胚中的___________细胞将发育成胎膜和胎盘。
(5)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的_________组成。
人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:
(1)制备单克隆抗体过程中要用到____________和____________技术。
(2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于_______,使小鼠产生能分泌相应________ 的_________细胞,此过程属于特异性免疫中的_______ 免疫。
(3)在细胞内DNA合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。
①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的____________ 成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。
②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_____________________________ 。
(4)此过程生产的单克隆抗体可以与____________ 特异性结合,从而诊断早孕。
图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列,现有MspI、BamHI、MboI、SmaI 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG,请回答下列问题:
(1)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段,其产物长度为_____________。
(2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaI完全切割,产物中共有____种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过_________技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。
(3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加_________的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含____________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。
(4)假设用BamHI切割DNA获取目的基因,用MboI切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHI? _____(能,不能,不一定)。因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处_______________。
目前我国在矿产资源开发中,坚持“谁污染、谁治理”“谁破坏、谁恢复”的原则,建立健全矿区生态环境恢复治理的责任机制。下列关于矿区废弃地生态恢复的叙述,合理的是
A.矿区废弃地生态修复的关键是尽可能依靠自然演替恢复其生态功能
B.适用于矿区生态环境恢复的措施是开发农田,增加农民收入
C.该生态工程恢复所遵循的主要原理是整体性原理、协调与平衡原理
D.矿石的开采只是破坏生态环境,不会产生其他危害
下图是一个农业生态系统模式图,关于该系统的叙述中,正确的是
A.该生态系统的主要成分是人
B.图中有2个箭头不能代表能量的流动
C.沼气池中的微生物多数是需氧型的分解者
D.多途径利用农作物提高了能量从农作物到家畜的传递效率
Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,可以利用PCR技术检测其转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。如图为克隆猪的培育及Bcl-2基因转录水平检测流程,下列说法错误的是( )
A.图中A细胞表示去核的卵母细胞,B细胞表示体细胞
B.在早期胚胎发育的不同时期提取的总mRNA是不同的
C.图中过程X表示逆转录,获得的cDNA可用于克隆猪基因组的测序
D.在PCR过程中,(Bcl-2 cDNA)/cDNA的比值反映Bcl-2基因的转录水平