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人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基...

人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图所示:

回答下列问题:

1)如图所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为____________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是_______________________

2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行______________处理。

3SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系进行扩增,然后对扩增产物进行检测是否含SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段。

PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNAdNTP(包含dATPdCTPdGTPdTTP)、引物以外,还应含有____________;其中,dNTP的作用是既能提供合成DNA的原料,又能____________,引物应选用如图2中的___________(填下图中标号)。

②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞_______(填不能)用作技术流程中转化过程的受体细胞。  

 

4)早期胚胎发育的过程大致为:受精卵________囊胚原肠胚,囊胚中的___________细胞将发育成胎膜和胎盘。

5)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的_________组成。

 

细胞核移植(体细胞核移植) 能保持正常的二倍体核型(能保持遗传物质不变) 同期发情 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) 提供能量 Ⅰ和Ⅳ 不能 桑椹胚 滋养层 (性)染色体 【解析】 1、PCR技术: (1)概念:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 (2)原理:DNA复制。 (3)前提条件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物。 (4)条件:模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶) (5)过程:①高温变性:DNA解旋过程(PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开);低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链。 2、动物核移植的概念:将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎。这个新的胚胎最终发育为动物个体。核移植得到的动物称克隆动物。 (1)将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中的技术称为细胞核移植技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是10代以内的细胞能保持正常的二倍体核型(能保持遗传物质不变)。 (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行同期发情处理。 (3)①PCR反应的条件:模板DNA、dNTP、引物、热稳定DNA聚合酶,其中,dNTP的作用是合成DNA的原料、提供能量。要扩增SRY基因,应选用如图2中的Ⅰ和Ⅳ作为引物。 ②只有母牛能产生乳汁,能作为生物反应器,因此若扩增产物含大量SPY基因片段,则该种牛胎儿为雄性,其成纤维细胞不能用作技术流程中转化过程的受体细胞。 (4)早期胚胎发育的过程大致为:受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚,囊胚中的内细胞细胞将发育成胎膜和胎盘,滋养层将发育成胎膜和胎盘。 (5)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是分析细胞的性染色体组成。
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考点分析:
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人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:

1)制备单克隆抗体过程中要用到________________________技术。

2)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于_______,使小鼠产生能分泌相应________ _________细胞,此过程属于特异性免疫中的_______ 免疫。

3)在细胞内DNA合成一般有两条途径,主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化作用合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的____________ 成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是_____________________________

4)此过程生产的单克隆抗体可以与____________ 特异性结合,从而诊断早孕。

 

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1表示含有目的基因DDNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列,图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列,现有MspIBamHIMboISmaI 4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为CCGGGGATCC、↓GATCCCCGGG,请回答下列问题:

1)若用限制酶SmaI完全切割图1DNA片段,其产物长度为_____________

2)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从隐性纯合子分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaI完全切割,产物中共有____种不同DNA片段。为了提高实验成功率,需要通过_________技术扩增目的基因,以获得大量的目的基因。

3)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行,形成重组质粒,那么应选用的限制酶是______________。在导入重组质粒后,为了筛选出含质粒的大肠杆菌,一般先用添加_________的培养基进行培养,然后将生长的菌接种到只含____________的培养基中培养,可进一步筛选出含重组质粒的受体细胞。

4)假设用BamHI切割DNA获取目的基因,用MboI切割质粒,然后形成重组质粒,若将插入在抗生素B抗性基因处的目的基因重新切割下来,能否用BamHI? _____(能,不能,不一定)。因为目的基因和抗生素B抗性基因拼接处_______________

 

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目前我国在矿产资源开发中,坚持“谁污染、谁治理”“谁破坏、谁恢复”的原则,建立健全矿区生态环境恢复治理的责任机制。下列关于矿区废弃地生态恢复的叙述,合理的是

A.矿区废弃地生态修复的关键是尽可能依靠自然演替恢复其生态功能

B.适用于矿区生态环境恢复的措施是开发农田,增加农民收入

C.该生态工程恢复所遵循的主要原理是整体性原理、协调与平衡原理

D.矿石的开采只是破坏生态环境,不会产生其他危害

 

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下图是一个农业生态系统模式图,关于该系统的叙述中,正确的是

A.该生态系统的主要成分是人

B.图中有2个箭头不能代表能量的流动

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D.多途径利用农作物提高了能量从农作物到家畜的传递效率

 

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Bcl-2基因是细胞凋亡抑制基因,可以利用PCR技术检测其转录水平,进而了解该基因与不同胚胎时期细胞凋亡的关系。如图为克隆猪的培育及Bcl-2基因转录水平检测流程,下列说法错误的是(   

A.图中A细胞表示去核的卵母细胞,B细胞表示体细胞

B.在早期胚胎发育的不同时期提取的总mRNA是不同的

C.图中过程X表示逆转录,获得的cDNA可用于克隆猪基因组的测序

D.PCR过程中,(Bcl-2 cDNA/cDNA的比值反映Bcl-2基因的转录水平

 

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