Question

如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是（    ）

A.操作前只要将接种环烧红并冷却后，就可离开酒精灯，进行接种试验

B.划线操作须在火焰上进行，以免杂菌污染

C.所需菌落只能在5区域中才可以得到

D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

Answer

D

【解析】

平板划线的操作的基本步骤是：
1、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞。
2、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面。
3、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连。
4、将平板倒置，放入培养箱中培养。

A、在每次划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，冷却后，在酒精灯火焰旁边，进行接种试验，A错误；
B、接种时划线操作是在火焰周围进行，B错误；
C、在5个区域中，只要有单个活细菌，通过培养即可获得所需菌落，C错误；
D、在1、2、3、4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，D正确。
故选D。