Question

下列有关基因工程基本操作程序的叙述，正确的是（    ）

A.基因工程的第二步不涉及碱基互补配对原则

B.人们常用Ca²⁺转化法将目的基因导入大肠杆菌细胞

C.常用分裂能力较强的动物体细胞作为基因工程的受体细胞

D.可提取转基因生物的基因组与用目的基因制作的探针进行杂交，根据杂交带的有无来判断基因是否转录

Answer

B

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质−−抗原−抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、基因工程的第二步是构建基因表达载体，该过程中涉及碱基互补配对原则，如用DNA连接酶连接具有相同黏性末端的DNA片段时涉及碱基互补配对原则，A错误；
B、将目的基因导入微生物细胞常用感受态细胞法，即Ca2＋处理法，使微生物细胞成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态，B正确；
C、动物细胞一般使用受精卵为基因工程的受体细胞，C错误；
D、提取转基因生物的mRNA与用目的基因制作的探针进行杂交，根据杂交带的有无来判断基因是否转录，D错误。
故选B。