Question

某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是（    ）

   

A.图中的质粒用酶A切割后，会产生8个游离的磷酸基团

B.在构建重组质粒时，可用酶A和酶C切割质粒和目的基因

C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长

D.若用酶B和酶C切割，可以避免质粒的自身环化

Answer

D

【解析】

“分子手术刀”--限制性核酸内切酶（限制酶）

（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的；

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

由于酶A和C都在质粒标记基因的位置，所以需要用酶B和C同时切割质粒和目的基因。

A、质粒中含有2个酶A的酶切位点，所以切割后会产生4个游离的磷酸基团，A错误；

B、如果用酶A和C同时切割质粒，会破坏质粒的标记基因，B错误；

C、根据B项分析，需要用酶B和C切割质粒和目的基因，导致四环素抗性基因被破坏，所以不能在含四环素的培养基中生长，C错误；

D、若用酶B和酶C切割，产生不同的黏性末端，避免质粒自身环化，D正确。

故选D。