Question

戴口罩、勤洗手是预防新型冠状病毒（COVID--19）的有效措施。某公司在防疫期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了凝胶洗手前后，手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。回答下列问题：

（1）在进行实验前需要配置培养基，培养基指的是________________________。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、____________。如果培养乳酸杆菌，还需要在培养基中添加________。

（2）为统计洗手前手部细菌的数量，应选择的接种方法是____________（填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”）。利用该方法统计活菌数量的原理是________________________。

（3）根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出两点建议：____________________。

（4）培养一段时间后可根据__________（至少填两项）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。为了计算洗手前手部单位面积的细菌数量，除上图所给的信息外，还需要知道____________________。

Answer

人们按照微生物对营养物质的需求不同，配制出供其生长繁殖的营养基质 无机盐 维生素 稀释涂布平板法 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就可以推测出样品中大约含有多少活菌 ①同一稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值 ②设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰 菌落的大小、形状（隆起程度和颜色） 稀释倍数和涂布平板时所取的稀释液体积

【解析】

1、各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源、氮源；另外，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质、氧气的要求。

2、微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

（1）培养基指人们按照微生物对营养物质的需求不同，配制出供其生长繁殖的营养基质。一般培养基中均含有碳源、氮源、水和无机盐，在培养乳酸杆菌时还需要额外添加维生素。

（2）平板划线无法得知稀释倍数，因此不能用于活菌计数。稀释涂布平板法用于活菌计数的原理是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就可以推测出样品中大约含有多少活菌。

（3）实验设计需要遵循对照原则和平行重复原则，因此需要的改进措施有：①同一种稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；②设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。

（4）菌落的特征包含菌落的大小、性状、颜色和隆起程度。洗手前手部单位面积的细菌数量=（平板上的菌落数÷涂布时取样的体积×稀释倍数×10ml）÷取样的面积，因此，除图中所给信息外，还需要知道稀释倍数和涂布平板时所取的稀释液体积。