Question

某公司在新冠防疫期间推出一款新型免洗洗手凝胶，为衡量该凝胶的清洗效果，研究人员检测了凝胶洗手前后，手部细菌的数量。凝胶洗手前后的检测流程见下图，回答下列问题：

（1）在进行实验前需要配置培养基，各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、___________。如果培养乳酸杆菌，还需要在培养基中添加____________。

（2）为统计洗手前后手部细菌的数量，应选择的接种方法是____________。若在M稀释倍数下统计出平板上的菌落数为N，涂布平板时所用的液体体积为V（ml），那么每克样品中的菌数为___________，而实际菌数要比计算值___________。

（3）根据上图所示的步骤得出的实验结果的可信度较低，为了提高实验结果的可信度，请给出两点建议：______________________、_________________________________。

（4）培养一段时间后可根据______________________（至少填两项）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。

Answer

无机盐 维生素（或生长因子） 稀释涂布平板法 N/V×M 大 同一个稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值 设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰 菌落的大小、形状（隆起程度和颜色）

【解析】

培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。单菌落分离法包含平板划线分离法和稀释涂布平板法分离，常用于分离获得单菌落。其中稀释涂布平板法可用于菌体计数。

（1）无机盐对维持生命活动非常重要，各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。有些微生物的培养还需要在培养基中加入生长因子，如培养乳酸杆菌。

（2）为统计洗手前后手部细菌的数量，应选择的接种方法是稀释涂布平板法。若在M稀释倍数下统计出平板上的菌落数为N，涂布平板时所用的液体体积为V（ml），那么每克样品中的菌数为N/V×M，由于计数时当两个或几个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以实际菌数要比计算值偏大。

（3）为了提高实验结果的可信度，需要检测培养基灭菌是否合格以及在同一稀释度下计数多个平板上的菌落数并求平均值，即提出的建议为：在同一个稀释度下涂布三个平板，取三个平板上菌落数的平均值；设置一组未接种的空白培养基，排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。

（4）培养一段时间后可根据菌落的大小、形状（隆起程度和颜色）等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。