满分5 > 高中生物试题 >

钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用,科学...

钙依赖蛋白激酶(CDPK)在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用,科学家通过将CDPK基因导入拟南芥中,来获得具有抗性的新品种。下图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图,图中标记了限制酶的切割位点。回答下列问题。

1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括_______________,为了使CDPK基因插入质粒中,应选取________________两种限制性核酸内切酶分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。

2)将获取的CDPK基因进行PCR扩增,目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶主要原因是_____________________________________

3)图中所示的质粒为Ti质粒,操作过程中需要把CDFK基因插入到质粒的T-DNA片段中,T-DNA片段在转化中的作用是____________________________。为了检测CDPK基因是否导入成功,可以用________________________________作探针检测CDPK基因是否导入拟南芥细胞,导入成功的标志是________________

4)为研究CDPK基因表达载体对拟南芥的遗传转化的影响,将转化后的拟南芥植株生长成熟后,采集其种子,播种于含________________________MS培养基中进行抗性筛选。

5)基因工程的核心是_________________  ,目的是 ____________________________

 

基因组文库和cDNA文库 XbaⅠ和SmalⅠ Taq酶热稳定性高,而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活 T-DNA片段能携带CDPK基因整合到受体细胞的染色体DNA上 放射性同位素标记的含有CDPK基因的DNA片段 显示出杂交带 卡那霉素 基因表达载体的构建 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用 【解析】 基因工程技术的基本步骤: (1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 (2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 (4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①应用DNA分子杂交技术检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因;②应用分子杂交技术检测目的基因是否转录出了mRNA;③应用抗原-抗体杂交技术检测目的基因是否翻译成蛋白质。个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 (1)基因文库包括基因组文库和cDNA文库,为了使CDPK基因插入质粒中,选择XbaⅠ和SmalⅠ能够将目的基因完整切下,并且在质粒的T-DNA片段中也有切点,而HindⅢ会影响目的基因的完整度,EcoRⅠ会破坏标记基因。 (2)将获取的CDPK基因进行PCR扩增,目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶主要原因是Taq酶热稳定性高,而大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活。 (3)图中所示的质粒为Ti质粒,操作过程中需要把CDFK基因插入到质粒的T-DNA片段中,T-DNA片段在转化中的作用是T-DNA片段能携带CDPK基因整合到受体细胞的染色体DNA上;为了检测CDPK基因是否导入成功,可以用放射性同位素标记的含有CDPK基因的DNA片段作探针检测CDPK基因是否导入拟南芥细胞,导入成功的标志是显示出杂交带。 (4)为研究CDPK基因表达载体对拟南芥的遗传转化的影响,将转化后的拟南芥植株生长成熟后,采集其种子,播种于含卡那霉素的MS培养基中进行抗性筛选,能成活的植株就是成功转基因的拟南芥植株。 (5)基因工程的核心是基因表达载体的构建 ,目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。
复制答案
考点分析:
相关试题推荐

在白酒发酵的窖池中,当培养液的pH≤4.5时,酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制,甚至停止。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力,适宜作白酒发酵生产用菌种,为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌,研究者进行了相关实验,请回答下列有关问题:

(1)在发酵过程中,窖池中培养液的pH会逐渐下降,原因是_________________________

(2)取窖底泥,溶于10mL无菌水中,再取1mL 上清液接入一定量的麦芽汁培养基中培养,其目的是_____________________,2天后分别接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上,培养结果见下表。为选择合适的菌种,根据培养结果,可从表格中pH范围为_________的培养基中获得菌种。注:“+”越多表示菌体长得越好

pH=5

pH=4

pH=3

pH=2.5

pH=2

+++++

++++

+++

++

+

 

(3)通过图示_____________法进行纯化培养,取最终的酵母菌稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,要将涂布器___________后才能进行操作。在恒温培养箱中培养一段时间后,其中某组的3个平板上菌落数分别为99个、92个、94个,则可以推测酵母菌液中每毫升含菌数为_____个。运用这种方法统计的结果往往较实际值偏小,原因是_____________

(4)实验获得了三个耐酸性较强的酵母菌菌株,特点如下表。

菌株

A

B

C

特点

pH≤3.5时,生长代谢正常、优于其它常规菌种

pH≤3.5时,生长代谢正常,pH4~6时不正常

pH2.5~6,生长代谢正常、优于其它常规菌种

 

依据菌株特点,研究者认为________菌株更适合作为白酒发酵菌株,作出这一判断的理由是____________________________________________________

 

查看答案

回答关于光合作用的问题:

下图甲曲线表示某植物在恒温30℃时光合速率与光照强度的关系,图乙是某同学探究影响植物光合速率的因素的实验装置图。试回答:

38、图甲曲线中,当光照强度为X点时,叶肉细胞中产生ATP的场所有___________________

39、已知该植物光合作用和呼吸作用的最适温度分别为25℃30℃,在其他条件不变的情况下,将温度调节到25℃,甲曲线中a点将向______移动,b点将向_____移动。

40、图乙装置中隔在灯与试管之间盛水玻璃柱可以吸收灯光的热量,避免________________

41、若实验中每隔5min改变一次试管与玻璃柱之间的距离,随着距离的增加,气泡产生速率下降,产生这一结果的原因是:

________________________________________________________

________________________________________________________

42、为了探究光照强度对光合速率的影响,利用乙图装置进行实验的设计思路是:_____________________________________________________________________

43、某研究小组从当地一湖泊的某一深度取得一桶水样,分装于六对黑白瓶中,剩余的水样测得原初溶解氧的含量为12 mg/L,白瓶为透明玻璃瓶,黑瓶为黑布罩住的玻璃瓶。将它们分别置于六种不同的光照条件下(由a→e逐渐加强),24小时后,实测获得六对黑白瓶中溶解氧的含量,记录数据如下:

光照强度(klx)
 

0(黑暗)
 

a
 

b
 

c
 

d
 

e
 

白瓶溶氧量mg/L
 

4
 

12
 

18
 

26
 

32
 

32
 

黑瓶溶氧量mg/L
 

4
 

4
 

4
 

4
 

4
 

4
 

 

 

该瓶中所有生物细胞在24 h内呼吸消耗的O2量为_____mg/L。当水层光照强度为c 时,在24h内白瓶中植物产生的氧气量为______mg/L。光照强度至少为______(填字母)时,该水层产氧量才能维持生物正常生活耗氧量所需。当光照强度为_______(填字母)时,再增加光照强度,瓶中溶解氧的含量也不会增加。

 

查看答案

花生种子中储藏的物质以脂肪(油)为主,并储藏在细胞的油体(植物细胞的一种细胞器)中。种子萌发时,脂肪水解成脂肪酸和甘油。其脂肪酸和甘油又分别在多种酶的催化作用下,形成葡萄糖,并最后转变成蔗糖,转运至胚轴,供给胚的生长和发育(如下图)。请回答下列问题:

1)组成脂肪的元素有__________,促进脂肪水解成脂肪酸和甘油的酶是__________

2)与萌发前相比,萌发中的花生种子细胞内,有机物种类数量的变化是__________

3)为了观察花生种子中的脂肪,需使用染液对种子的切片进行染色,并在__________下进行观察。若观察到大量的红色颗粒,则所使用的染液可能是__________染液。

4)实验证明,相同质量的脂肪彻底氧化分解所释放的能量比糖类多。在有氧呼吸过程中,释放能量最多的阶段是第三阶段。因此,相同质量的脂肪和糖类在化学元素含量上最主要的不同点是__________

5)在脂肪储藏和转变成蔗糖的过程中,先后依赖于油体、乙醛酸循环体(植物细胞的一种细胞器)、线粒体等多种细胞器。该实例可以说明,多种细胞器之间作用的特点是__________

 

查看答案

野生型大肠杆菌能够在基本培养基中生长,突变菌株A和突变菌株B由于不能自己合成某些营养素,而不能在基本培养基上生长。科学工作者利用菌株A和菌株B进行了如下两个实验。实验一:将菌株A和菌株B混合后,涂布于基本培养基上,结果如图1;实验二:将菌株A和菌株B分别置于U型管的两端,中间由过滤器隔开。加压力或吸力后,培养液可以自由流通,但细菌细胞不能通过。经几小时培养后,将菌液AB分别涂布于基本培养基上,结果如图2。下列推测正确的是(   

A.不同菌株间不接触也能交换遗传物质

B.菌株之间可能发生类似有性杂交的现象

C.菌株A和菌株B含有相同的突变基因

D.混合培养的菌株都能在基本培养基上生长

 

查看答案

植物甲与植物乙的净光合速率随叶片温度(叶温)变化的趋势如图所示。下列叙述错误的是(   

A.植物甲和乙光合作用所需要的能量都 来自于太阳能

B.叶温在 3650℃时,植物甲的净光合 速率比植物乙的低

C.叶温为 25℃时,植物甲的光合与呼吸 作用强度的差值不同于植物乙的

D.叶温为 35℃时,甲、乙两种植物的光合与呼吸作用强度的差值均为 0

 

查看答案
试题属性

Copyright @ 2008-2019 满分5 学习网 ManFen5.COM. All Rights Reserved.