Question

由于塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害，加拿大年仅16岁的高中生丹尼尔·伯德从当地一个垃圾场获取泥土样本，将泥土样本跟聚乙烯和一些促进细菌生长的溶液混合，探究培养液对塑料袋碎片的分解效果。结果，他发现绿脓杆菌和甲氰菊酯降解菌两种细菌分解聚乙烯最为有效，回答下列有关问题。

（1）他从垃圾场的泥土样本中获取分解聚乙烯的细菌，是因为在寻找目的菌株时，要根据__________。

（2）纯化菌株常采用平板划线法，此过程所用的接种工具是__________，此接种工具常采用________灭菌法进行灭菌。

（3）对统计样品中细菌的数目进行计数时，常采用__________法进行接种。但统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________，原因是____________________。

（4）实验结束后，为防止造成对环境污染，对使用过的培养基的处理是____________________。

Answer

目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找 接种环 灼烧 稀释涂布平板 偏低 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 灭菌处理后倒掉

【解析】

接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法：由接种环沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。

（1）目的菌株与其生存的环境具有适应性，所以根据目的菌株对生存环境的要求，可到相应的环境中去寻找，由于垃圾场中塑料袋碎片多，故可从垃圾场的泥土样本中获取分解聚乙烯的细菌。
（2）平板划线常用的接种工具是接种环，接种环可采用灼烧灭菌的方法进行灭菌。
（3）对菌体计数常采用稀释涂布平板法接种。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目偏低。
（4）实验结束后，为防止造成对环境污染，对使用过的培养基需要灭菌处理后再倒掉，以防止杂菌污染环境。