Question

下列有关基因工程的叙述不正确的是（    ）

A.用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段，可获相同黏性末端

B.质粒上的抗生素抗性基因有利于鉴别和筛选含目的基因的受体细胞

C.将重组Ti质粒转入农杆菌之前，常用Ca²⁺处理农杆菌使其成为感受态细胞

D.用DNA分子杂交法检测目的基因已插入染色体DNA上，则说明转基因植物生产成功

Answer

D

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

A、基因工程中，构建基因表达载体时，要用同种限制性核酸内切酶切割载体与含目的基因的DNA片段，以获得相同黏性末端，A正确；

B、质粒上的抗生素抗性基因为标记基因，有利于重组后重组子的筛选，即鉴别和筛选含目的基因的受体细胞，B正确；

C、将重组Ti质粒转入农杆菌之前，常用Ca2+处理农杆菌使其成为感受态细胞，再将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进受体细胞吸收DNA分子，完成转化过程，C正确；

D、用DNA分子杂交法检测目的基因已插入染色体DNA上，则说明导入成功；植物表现出抗虫特性，则说明转基因植物生产成功，D错误。

故选D。