Question

餐厨垃圾废液中的淀粉、蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用，但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，来制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理如下表所示：

编号	R0	R1	R2	R3
圆褐固氮菌：巨大芽孢杆菌	1：0	0：1	1：1	2：1

将上表菌液分别接种于l00mL__________中进行振荡培养，振荡处理的目的是__________。本实验还需设置对照组为__________。

②培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行__________稀释，然后分别取0. 1mL的菌液采用__________法接种于基本培养基中培养。进行计数时，可依据__________对两种菌进行区分，并选取菌落数在__________内的平板。实验结果如下图所示，由实验结果可知__________。

（2）为进一步探究菌种比例对该餐厨垃圾废液中蛋白质、脂肪等有机物的降解效果，测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知分别选取__________的接种比对该餐厨垃圾废液中蛋白质、脂肪降解效果最好。废液中个别组蛋白质含量在后期升高，分析可能的原因是__________。

Answer

某餐厨垃圾废液 供氧、目的菌与培养液充分接触 接种等量无菌水 梯度 涂布 菌落形态 30～300 两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种；两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化 R3、R1 随着固氮菌和芽孢杆菌的大量繁殖其产生的蛋白酶及脂肪酶等导致蛋白质含量增加或者两种菌的不同配比，产生的蛋白酶的种类不同

【解析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

在统计菌落数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

（1）①要探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水。

②培养3天后要测定活菌数，需要进行稀释涂布平板法进行接种，故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0. 1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，且两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长，脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。随着固氮菌和芽孢杆菌的大量繁殖其产生的蛋白酶及脂肪酶等导致蛋白质含量增加或者两种菌的不同配比，产生的蛋白酶的种类不同，均会导致废液中个别组蛋白质含量在后期升高。