Question

2019 年末，武汉出现由 SARS-CoV-2 病毒引发的 COVID-19 肺炎，该病毒的遗传物质为单链 RNA。请回答下列有关问题：

（1）检测 COVID-19 肺炎常用间接免疫荧光法：根据特异性抗体与抗原会发生反应的原理，把冠状病毒标本固定在玻片上，然后将待测病人的血清滴在玻片上，再加入荧光素标记的试剂，洗涤后在荧光显微镜下观察，若_____，则说明待测病人为 新冠肺炎患者。

（2）研究表明，从恢复期患者的血清中提取相应抗体用于治疗 COVID-19 患者，其临床状况已有明显改善。但是与单克隆抗体相比，血清抗体具有_____的特点，因 此治疗用途受到限制。为此，进行如下尝试：

①研究组一：选用单克隆抗体技术，将 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，再用选择培养基进行筛选，在该培养基上，_____的细胞和_____的细胞都会死亡。

②研究组二：将上述筛选所得融合细胞经过稀释后，多孔培养板中每个孔中细胞数量不多于_____个，再进行_____培养并筛选，以便于最终得到能产生特异性抗 体的杂交瘤细胞。

Answer

出现荧光标记 产量低、纯度低、特异性差 未融合 同种核融合 1 克隆化

【解析】

1、间接免疫荧光法的原理抗原-抗体杂交法。
2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养或注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。
3、血清抗体与单克隆抗体相比，存在的缺点是产量低、纯度低、特异性差；单克隆抗体特点为特异性强、灵敏度高、可大量制备。

（1）根据特异性抗体与抗原会发生反应的原理，把冠状病毒标本固定在玻片上，然后将待测病人的血清滴在玻片上，再加入荧光素标记的试剂，洗涤后在荧光显微镜下观察，若出现荧光标记，则说明待测病人为新冠肺炎患者。
（2）血清抗体的特点：产量低、纯度低、特异性差。
①研究组一：选用单克隆抗体技术，将B淋巴细胞与骨骼瘤细胞进行融合，再用选择性培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的细胞（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞）和同种核融合的细胞（B淋巴细胞和B淋巴细胞的融合体、骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合体）都会死亡，只有杂交瘤细胞才能存活。
②研究组二：将上述筛选所得融合细胞经过稀释后，多孔培养板中每个孔中细胞数量不多于1个，目的是可保证每个培养孔的杂交瘤细胞来自于同一个杂交瘤细胞的克隆。然后再将多孔板中的细胞进行克隆化培养并通过抗体检测筛选，以便于最终得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。