Question

回答下列与动物细胞培养有关的问题：

（1）动物细胞的体外培养需要满足营养物质的供应、适宜的温度和pH值，__________的环境以及气体环境。细胞培养所需气体主要有_______。

（2）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面__________时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的__________。此时，瓶壁上形成的细胞层数是__________层。

（3）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_____________现象；但极少数细胞可以获得__________，连续增殖，其中有些细胞黏着性__________，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的含量_______。

（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到有丝分裂__________期的细胞用显微镜观察。

Answer

无菌无毒 氧气和二氧化碳 相互接触 接触抑制 单层（1层） 衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 中

【解析】

动物细胞培养的条件包括①无菌、无毒的环境：消毒灭菌、添加一定量的抗生素、定期更换培养液，以清除代谢废物；②营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；③温度和pH；④气体环境：95%空气和5%的CO2。

从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞，原代培养细胞传至10代左右就不容易传下去，细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数细胞能存活传到40～50代，细胞株传到50左右不能再继续传代，部分细胞遗传物质改变，具有癌变细胞的特点，可以在培养条件下无限制的传代下去。

（1）动物细胞的体外培养条件包括营养物质的供应、适宜的温度和pH值、无菌无毒的环境以及气体环境。细胞培养所需气体主要有氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所需，二氧化碳维持培养液的pH。

（2）在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，该现象为细胞的接触抑制。此时，瓶壁上形成单层细胞。

（3）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象；但极少数细胞可以克服细胞寿命的自然极限，获得不死性，连续增殖，朝着等同于癌细胞的方向发展，其中有些细胞黏着性降低，细胞膜表面蛋白质的含量减少。

（4）由于有丝分裂中期染色体形态固定、数目清晰，因此检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到有丝分裂中期的细胞用显微镜观察。