Question

微卫星DNA是广泛分布于真核生物基因组中的简单重复序列。由于重复单位和重复次数在个体间表现出一定的遗传性和差异性，因此微卫星DNA可以作为分子标记，并有着广泛应用。

（1）可以用标记的__________________为探针，与基因组文库进行杂交筛选，然后再经多个步骤获取微卫星DNA。

（2）扩增微卫星DNA序列A7I0的PCR反应体系中含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及耐热的DNA聚合酶。其中dNTP的作用是_____________________________； PCR技术护增目的基因的前提是_________________________，以便根据这一序列合成引物，所以引物应选用下图中的_________（填图中标号）。PCR的基本反应步骤为__________________________，其产物以_______________形式扩增。

（3）根据“微卫星DNA”的特点判断，应用这种标记可进行的研究有________（填字母）。

①人类亲子鉴定                             ②调查某地大熊猫种群数量

③诱导基因突变                              ④冠状病毒遗传物质测序

A．①②              B．②③             C．③④               D．①④

Answer

微卫星DNA（重复序列） 合成DNA的原料、提供能量 有一段已知目的基因的核苷酸序列 Ⅰ和Ⅳ DNA解链-引物结合到互补链-互补链的合成（变性、复性/退火、延伸） 约为2n（指数） A

【解析】

PCR一般要经历三十多次循环，每次循环可分为变性、复性、延伸三步。在循环之前，常需要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。

PCR过程为:

变性，当温度上升到90 ℃以上时，氢键断裂，双链DNA解旋为单链。

复性，当温度降低到50℃左右是，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

延伸，温度上升到72 ℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。

（1）由于微卫星DNA是真核生物基因组中的简单重复序列，而且在个体间表现出一定的遗传性和差异性，因此可以用标记的微卫星DNA（重复序列）为探针，与基因组文库进行杂交筛选，然后再经多个步骤获取微卫星DNA。

（2）PCR反应体系中含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物及耐热的DNA聚合酶。其中缓冲液模拟的是细胞中DNA复制的环境，dNTP是合成DNA的原料、并能提供能量，引物为子链的合成提供起始点，DNA聚合酶催化DNA的复制过程； PCR技术扩增目的基因的首要条件是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物，引物能够与模板DNA链进行碱基互补配对，而后在DNA聚合酶的作用下，单个的脱氧核苷酸连接到引物的3’端，所以引物应选用下图中的Ⅰ和Ⅳ（填图中标号）。PCR的步骤包括DNA解链（高温变性）--引物结合到互补链（低温复性）-互补链的合成（中温延伸），其产物大约以2n（指数）形式扩增。

（3）由于微卫星DNA在个体间表现出一定的遗传性和差异性”因此应用这种标记可进行的研究有：

①由于微卫星DNA在个体间表现出一定的遗传性和差异性，因此可以用于人类亲子鉴定 ，① 正确

②可利用微卫星DNA的特性进行某地大熊猫种群数量的调查，②正确；

③诱导基因突变的因素有物理因素、化学因素和生物因素，与微卫星DNA的特性联系不起来，③错误；

④冠状病毒遗传物质是RNA，其测序过程与微卫星DNA无关，④错误；即①②正确。

故选A。