Question

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶A分解木糖产生酒精。回答下列问题：

（1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，下列选项需要的是_______(填序号)。

①酒精灯　②接种环　③高压蒸汽灭菌锅　④培养皿

（2）将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以________为碳源的培养基中，在______(填“有氧”或“无氧”)条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。

（3）分离纯化菌种的方法一般有平板划线法和_____________________。

（4）纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明__________________________。

（5）生产上常将酶A固定化以反复利用。部分操作如下：将酶A固定在__________(填“溶于水”或“不溶于水”)的载体上，将其装入反应柱内后，需用蒸馏水充分洗涤固定化酶柱，以除去未吸附的酶A。一般来说，酶不适合采用_________________法固定化。

Answer

①③④ 木糖 无氧 稀释涂布平板法 其分子量越小 不溶于水 包埋

【解析】

从自然界中分离能能利用酶A分解木糖产生酒精的酵母菌，据微生物的特征，采用各种方法从含菌样品中获得由单一个体（如单一菌体或孢子）或一段菌丝生长繁殖形成的微生物群体的过程。常用的分离方法有平板划线法，稀释涂布法，平板分离法，稀释倾注平板分离法和单细胞分离法。

（1）在制备含琼脂的培养基和倒平板的过程中，需要的操作有：①相关操作需要在酒精灯火焰旁进行，①正确；②制备培养基时不需要接种环，②错误；③培养基需要用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，③正确；④制备培养基时需要培养皿，④正确。故选①③④。
（2）常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖来进行酒精发酵，而自然界中某些酵母菌能利用酶 A 分解木糖产生酒精，将自然界收集的酵母菌菌株转接到仅以木糖为碳源的培养基中，在无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌不能利用木糖发酵。
（3）分离纯化菌种的方法一般有平板划线法和稀释涂布平板法。
（4）纯化后的酶A可以用电泳法检测其分子量大小，在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越小。
（5）固定化酶时，所用的载体不溶于水；酶分子较小，容易从包埋材料中漏出来，因此一般来说，不适合采用包埋法固定化。