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某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免...

某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(XYZ),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如图甲所示:图乙是单克隆抗体制备流程的简明示意图。请回答下列有关问题: .

(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过__________次免疫后 才能有符合要求的。达到要求后的XY、这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是__________小鼠,理由是______

(2)图乙中的过程诱导融合运用的原理是___________ 该过程中区别于植物原生质体融合的方法是用___________处理。

(3)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有_____,(只考虑细胞两两融合)。融合后需要用特定的__________培养基师选,只有杂交瘤细胞才能生长,该细胞的特点是___________

(4)经过筛选和克隆化培养得到杂交瘤细胞后,一般采用体内培养和体外培养两种方式,动物细胞体外培养时通入适量CO2的目的是_____

(5) 未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是__________

 

四 Y Y的血清抗体效价最高 细胞膜的流动性 灭活的病毒 B淋巴细胞相互融合形成的细胞、鼠骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞 选择 既能无限增殖,又能产生特异性抗体 维持培养液的pH (已免疫的)B淋巴细胞已高度分化(或不能无限增殖) 【解析】 试题本题结合图解,考查体液免疫及单克隆抗体的制备过程。分析柱形图:用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价,由图可知,随着免疫次数的增加,血清抗体效价逐渐升高。在第四次免疫过程中出现了Y血清抗体均达到16000以上;在第五次中,Y的效价最大,最适合用于制备B淋巴细胞;B细胞与骨髓瘤细胞形成的杂交细胞有三种:B淋巴细胞自身融合的细胞,骨髓瘤细胞自身融合的细胞和杂交瘤细胞。 (1)由图可知,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价均达到16000以上,因此小鼠最少需要经过四次免疫后 才能有符合要求的。小鼠Y的B淋巴细胞产生血清抗体效价最高,最适用于制备B淋巴细胞。 (2)图乙中的过程②为小鼠B细胞和骨髓瘤细胞的融合,制备单克隆抗体用到了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术,运用的原理是细胞膜的流动性。该过程中区别于植物原生质体融合的方法是用灭活的病毒处理。 (3)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、鼠骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞。融合后需要用特定的选择性培养基筛选,只有融合的杂种细胞才能生长,这种细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体。 (4)动物细胞体外培养需要满足的条件:无菌、无毒的环境、营养、温度和pH、气体环境。通入适量CO2的目的是维持培养液的pH。 (5)(已免疫的)B淋巴细胞已高度分化(或不能无限增殖),未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活。
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P450是石油降解的关键酶,用SalINdeI联合酶切获得的P450基因,与图甲所示的质粒(pCom8)重组,导入土著菌种Y9,获得了基因工程菌P450/Y9.图中mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的菌落变成黑色,aacCl 是庆大霉素(一种抗生素)抗性基因,限制酶NdeI. XhoISspI在原质粒上均只有一个酶切位点,数字表示酶切位点间的碱基对数。图乙表示几种限制酶的识别序列和切割位点,请回答下列有关问题:

 

(1)基因表达载体除了含有图甲所示的条件外,还应该含有_____________________

(2) Sall切割目的基因形成的黏性末端是__________.构建pCom8重组质粒时,需用_______(限制酶)对图示质粒进行处理,才能与P450基因在___________的作用下形成重组质粒。

(3)经测定原质粒为7.6kb (Ikb 1000个碱基对),重组质粒经Nde|Ssp I联合酶切后获得了6.0kb1.2kb的两个片段,则目的基因的长度为_____kb.

(4)为了扩增重组质粒,需将其转入用____________预先处理的土著菌种 Y9中,提高质粒导入率, .以便获得更多基因工程菌P450/Y9.为了筛选出转入了重组质粒的基因工程菌P450/Y9,应在筛选平板培养基中添加___________,选择颜色为___________的菌落扩 大培养,进而筛选出所需的工程菌.

(5)为检测基因工程菌降解石油的能力,科研人员做了如下4组实验,测定不同时间各组的石油降解率,实验结果见下图。据图分析以下说法正确的有___________

A.单独使用P450/Y9对石油的降解能力比单独使用Y9略强

B.作用时间越长,P450/Y9 对石油降解的能力越强

C.联合使用时,P450/Y9 能显著增加四种菌的整体降解石油的能力

D.为达到更好的效果,最好单独使用基因工程菌P450/Y9

 

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幽门螺杆菌是栖息在胃黏膜的螺旋形的革兰氏阴性菌(革兰氏阴性菌对万古霉素、两性霉素B等抗生素不敏感),能产生有较强活性的脲酶,该酶能催化热稳定性低的尿素分解为氨和二氧化碳。因为胃液的强酸性,早期人们都认为没有细菌能在极酸的胃液中生存,1983年, 澳大利亚科学家马歇尔以身试菌,提出幽门螺杆菌是胃炎、十二指肠溃疡或胃溃疡的主要致病菌,这-发现使这些疾病的诊断和根治迎来了曙光。请根据上述资料回答下列问题:

(1)下图中最可能代表幽门螺杆菌的结构模式图的是_________(填写字母)


 

(2)提取胃炎患者的_________稀释液,分离得到幽门螺杆菌并统计其数量,分离时可将稀释液样品接种在以_________为唯一氮源的固体培养基上。欲得到预期的实验结果,接种过程用到的实验器材有_________ (填写字母)


 

(3)为研究培养幽门螺杆菌所需的气体条件,某研究小组利用半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)对幽门螺杆菌进行培养。下图代表微生物可能出现的四种生长状态。


 

 

若培养微生物是酵母菌,则__________号试管代表其生长状态, 号试管代表幽门螺杆菌的生长状态,则培养幽门螺杆菌的气体最适条件应为下列选项中的_________

A.纯氧B.90%N2. 10%CO2C.无菌空气D.5%O285%N2、 10%CO2

(4)将上述实验分离纯化得到的幽门螺杆菌进行扩大培养,采用布氏肉汤基础培养液进行培养,培养液中需加入混合抗生素(包括万古霉素、两性霉素B),其目的是_________

(5)目前13C呼气检测是诊断幽门螺杆菌感染的方法之一。其做法是:让病人口服一定量的13C-尿素,约30分钟后检测待检者呼出的气体中是否含有13CO2.13C-尿素呼吸检测的原理是患者消化道细胞内__________ ("")脲酶活性,若呼出的气体中含有13CO2,则为__________的代谢产物。

(6)幽门螺杆菌导致的胃溃疡等疾病可通过同时服用多种抗生素根除。研究小组将浸有相同浓度不同种类的抗生素圆纸片置于幽门螺杆菌培养基表面,370C培养4周,实验结果如下图所示。其中圆纸片AB分别浸过抗生素A和抗生素B,圆纸片C浸过抗生素A、B的混合物。实验中圆纸片D用作实验对照,实验表明___________


 

 

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黄瓜的靶斑病主要危害黄瓜叶片,该病初期,叶片上出现黄点而后黄点逐渐扩大甚至连成片,导致叶片失绿、干化变脆,严重影响黄瓜叶片的光合作用。研究人员研究了不同程度的靶斑病对黄瓜叶片光合作用的影响得到的结果如下表所示。请分析并回答下列问题:

病级

病斑面积(%)

 

叶绿素含量(%)

净光合速率

[μmol. (m2.s)-1

气孔导度

[umol. (m2s)-1]

0

0.00

53.70

20.76

0.40

1

2.57

31.92

18.88

0.38

3

9.69

29.45

15.44

0.36

5

28.84

20.54

15.39

0.32

:病级指黄瓜叶片患靶斑病的不同程度:气孔导度指气孔张开的程度。
(1)提取黄瓜叶片中的光合色素时要使用__________试剂, 研磨时同时加入SiO2CaCO3加入CaCO3的目的是_____

(2)在提取到黄瓜叶片光合色素后,可通过对比各组黄瓜叶片对某种颜色的光的吸收率来计算叶片中的叶绿素含量。为减少其他光合色素的干扰,“某种颜色的光”最可能是__________(红光蓝紫光"绿光"),原因是__________

(3)在实验过程中,黄瓜叶肉细胞产生O2的去向是__________。根据表中提供的数据推测,靶斑病通过影响光合作用的____________阶段使黄瓜的净 光合速率降低。

(4)某科研小组在晴朗的白天,分别对生长在强光下和弱光下的黄瓜幼苗吸收co,的速率(单位: gcm2-h-1)、气孔阻力(气孔开度减小,气孔阻力增大)等生理指标进行了测定,结果如下图所示。

若一天中温度不变,强光下黄瓜幼苗制造有机物的最大速率为__________g.cm-2.h(co2的质量表示)。实验测得10:00- 12:00间光照强度不断增强,因__________增大,强光下黄瓜幼苗吸收CO2的速率却下降。

②若温度在一天中会发生变化,科研小组若要测定黄瓜幼苗一天中某一时段的光合速率,还要测定幼苗的__________ 若在白天进行该过程,需采取____________措施。

 

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小麦的穗发芽影响其产量和品质。某地引种的红粒小麦的穗发芽率明显低于当地白粒小麦。为探究淀粉酶活性与穗发芽率的关系,进行了如下实验:

(1)取穗发芽时间相同、质量相等的红、白粒小麦种子,分别加蒸馏水研磨,制成提取液(去淀粉),并在适宜条件下进行实验。实验分组、步骤及结果如下:

 

红粒管

白粒管

对照管

加样

0.5 mL提取液

0.5 mL提取液

C

加缓冲液(mL)

1

1

1

加淀粉溶液(mL)

1

1

1

 

370C保温适当时间,终止酶促反应,冷却至常温,加适量碘液显色

显色结果

+++

+

+++++

 

:“数目越多表示蓝色越深。

步骤①中加入的C__________, 步骤中加缓冲液的目的是__________。显色结果表明:淀粉酶活性较低的品种是__________; 据此推测:淀粉酶活性越低,穗发芽率越_________。若步骤③中的淀粉溶液浓度适当减小,为保持显色结果不变,则保温时间应__________

(2)小麦淀粉酶包括a-淀粉酶和β淀粉酶,为进一步探究其活性在穗发芽率差异中的作用,设计了如下实验方案:

x处理的作用是使__________ I中两管显色结果无明显差异,且II中的显色结果为红粒管颜色显著深于白粒管,则表明______活性是引起这两种小麦穗发芽率差异的主要原因。

(3)某同学用淀粉酶探究pH (HClNaOH调节)对酶活性的影响(已知HCI能催化淀粉水解,其他无关变量相同且适宜),得到如图所示的实验结果。下列实验分析正确的有_____


 

A.本实验以1h后淀粉剩余量作为检测因变量的指标

B.pH3pH9时淀粉酶的活性相同

C.欲测出pH=5时淀粉酶催化淀粉水解的量,还需设置相同pH但不加淀粉酶的对组

D.对比pH1pH7时两组实验结果,说明淀粉酶降低化学反应活化能的作用更显著

 

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下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是(   

A.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养

B.在原代培养过程中,细胞在培养液中悬浮生长和增殖

C.接触抑制的细胞经分散后继续培养,细胞将不再增殖

D.动物细胞培养时要求培养瓶或培养皿内表面光滑

 

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